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上海穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建

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穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建

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 上海申知心生物科技有限公司(簡稱“申知心生物”),是一家“提供全面、系統(tǒng)、高質(zhì)量的心血管相關(guān)疾病研究服務(wù)平臺”的創(chuàng)新型企業(yè),致力于搭建基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床轉(zhuǎn)化服務(wù)體系并開展基于藥效學(xué)評價的臨床前CRO服務(wù),提供各種成熟的心血管疾病模式動物。公司投資建立的動物實(shí)驗(yàn)中心,建有清潔級、SPF級動物實(shí)驗(yàn)室,面積約1800平米。為科研院所、臨床科室及醫(yī)藥企業(yè)提供專業(yè)定制化的動物模型、藥物篩選、藥理藥效評價、安全性評價、病理分析及分子生物學(xué)檢測等服務(wù)。

 

 申知心生物擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),核心成員來自中科院、復(fù)旦、交大、同濟(jì)等國內(nèi)重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),并與心血管病研究所保持密切合作,能夠提供完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)咨詢與服務(wù)。

 

 

 

 

心血管疾病動物模型,動脈粥樣硬化模型,高血脂癥動物模型,缺血性心臟病動物模型,心肌病動物模型,高血壓動物模型,肺動脈高壓動物模型,心血管模型,心血管相關(guān)原代分離

上海穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建

一、詳細(xì)介紹
        上海穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中、雖然可以達(dá)到高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)數(shù)天,在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)(依賴各種不同的構(gòu)建手段)分析結(jié)果,常常用到一些報告基因系統(tǒng)如熒光蛋白,β-半乳糖苷酶等來幫助檢測。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染則是外源質(zhì)粒DNA整合到宿主細(xì)胞染色體上,使宿主細(xì)胞可長期表達(dá)目的基因及蛋白,需要在瞬時轉(zhuǎn)染基礎(chǔ)上對靶細(xì)胞進(jìn)行篩選或者應(yīng)用高轉(zhuǎn)染效率的病毒。建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系時,需根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物對靶細(xì)胞進(jìn)行篩選,常見的抗性標(biāo)志物有潮霉素(hygromycin)、嘌呤霉素(puromycin)和新霉素(neomycin)。篩選得到的細(xì)胞能夠穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白,可以用于目的蛋白的擴(kuò)增和富集,或者得到穩(wěn)定沉默特定基因的細(xì)胞株。



二、服務(wù)項(xiàng)目及周期
 

 

服務(wù)編號

項(xiàng)目名稱

周期(工作日)

SCL001

載體構(gòu)建及鑒定

10-14

細(xì)胞轉(zhuǎn)染及篩選

15-20

細(xì)胞單克隆化培養(yǎng)

20-30

RT-PCR、WB檢測

15

實(shí)驗(yàn)報告整理

2



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