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上海Tunel檢測實驗

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 上海申知心生物科技有限公司(簡稱“申知心生物”),是一家“提供全面、系統(tǒng)、高質(zhì)量的心血管相關疾病研究服務平臺”的創(chuàng)新型企業(yè),致力于搭建基礎醫(yī)學和臨床轉(zhuǎn)化服務體系并開展基于藥效學評價的臨床前CRO服務,提供各種成熟的心血管疾病模式動物。公司投資建立的動物實驗中心,建有清潔級、SPF級動物實驗室,面積約1800平米。為科研院所、臨床科室及醫(yī)藥企業(yè)提供專業(yè)定制化的動物模型、藥物篩選、藥理藥效評價、安全性評價、病理分析及分子生物學檢測等服務。

 

 申知心生物擁有專業(yè)的技術團隊,核心成員來自中科院、復旦、交大、同濟等國內(nèi)重點高校及科研機構(gòu),并與心血管病研究所保持密切合作,能夠提供完善的實驗技術咨詢與服務。

 

 

 

 

心血管疾病動物模型,動脈粥樣硬化模型,高血脂癥動物模型,缺血性心臟病動物模型,心肌病動物模型,高血壓動物模型,肺動脈高壓動物模型,心血管模型,心血管相關原代分離

上海Tunel檢測實驗

上海Tunel檢測實驗的原理:

細胞在發(fā)生凋亡時,會激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發(fā)現(xiàn)180-200bpDNA ladder。基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。

TUNEL檢測(石蠟切片)

取下適當?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:120:1之間,4攝氏度保存運輸;

TUNEL檢測(冰凍切片)

取下的新鮮組織應立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運輸,固定好的切片應于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測;

TUNEL檢測(細胞爬片)

細胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運輸,盡快用于檢測;

熒光法需要先拍一張凋亡熒光圖,再拍一張原位染核圖,再合并圖層,終我們提供的為三張熒光圖片。




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