KK小鼠脂联素(ADP)科研elisa试剂盒上海润裕生物科技有限公司提供免费代测，从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。咨询！

规格：96T/48T

性状：液体

存储：4℃保存6个月

运输方式：快递发货

KK小鼠脂联素(ADP)科研elisa试剂盒组成：

（1）结合物及标本的稀释液；

（2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

（3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

（4）酶的底物；

（5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），elisa试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；

（6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）

KK小鼠脂联素(ADP)科研elisa试剂盒用途：科研与实验试剂，不得用于临床诊断。

检测种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。

标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

储存方式

标本的采集与保存：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。                                                         

◇液体类标本：                                

    标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。                                 

◇血清：        

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。        

◇血浆：        

　　  应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。             

◇尿液、胸腹水、脑脊液：        

  　　用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。        

◇细胞培养上清：        

 　　检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。        

◇组织标本：                

  　　切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。                

4. 细胞裂解液：

1）贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞（悬浮细胞可直接离心收集）；

2）将收集到的细胞用冷 PBS 洗 3 次；

3）物理方法裂解细胞（可先超声破碎细胞，再反复冻融）：

i 超声破碎：取适量 PBS 重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。

ii 反复冻融：将待破碎的细胞在-20℃ 以下冰冻，室温融解，反复 3 次，使细胞溶胀破碎。

4）将标本于 2-8℃ 1500×g 离心 10 分钟，收集上清备用。

5. 细胞培养上清或其它生物标本：请 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃ 或-80℃ 保存，但应避免反复冻融。

注意事项

1. 以上标本均需密封保存，4℃ 保存应小于 1 周，-20℃ 不应超过 1 个月，-80℃ 不应超过 2 个月。

2. 标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。

3. 标本溶血会影响*后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

试剂准备

1.使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温 （18-25℃），试剂不能直接在 37℃ 溶解。

2.标准品 （冻干品）：每瓶标准品加入标准品稀释液 1 mL，盖好后室温静置大约 10 分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为 1000pg/mL。准备 7 个稀释标准品的 EP 管，每个 EP 管中加入 500μL 的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成 1000pg/mL，500pg/mL，250pg/mL，125pg/mL，62.5pg/mL，31.2pg/mL，15.6pg/mL，标准品稀释液 （0pg/mL） 直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

3.检测溶液 A 及检测溶液 B：Detection A 及 Detection B 在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液 A 或 B1:100 稀释 （如：10μL 检测溶液 A/990μL 检测稀释液 A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制 （100μL/孔），实际配制时应多配制 0.1-0.2 mL。

4.浓洗涤液：用 580 mL 蒸馏水或去离子水将 20 mL 浓洗涤液稀释至 600 mL，进行 30 倍稀释。

5.底物溶液：请用灭菌的移液器吸头吸取所需体积的 TMB 至另一干净容器中使用，容器中剩余的底物应予丢弃，不要倒回 TMB 瓶中。

KK小鼠脂联素(ADP)科研elisa试剂盒注意：

1、 标准品的稀释不能直接在板中进行。

2、 标准品请于临用前 15 分钟内配制。该标准品只能使用一次。

3、 标准品、检测溶液 A 工作液、检测溶液 B 工作液请使用相应的稀释液配制，不能混淆。混匀时要轻轻充分混匀，避免起泡。为保证实验结果的准确请使用微量吸管，并校准微量加液器。请依据所需的量精确配制，尽量不要微量配制 （如吸取检测溶液 A 时，一次不要小于 10μL），以避免造成浓度误差。

4、 请勿重复使用已经稀释过的标准品、检测溶液 A 工作液和检测溶液 B 工作液。

5、 浓洗涤液中如有结晶析出，请先温育至室温，轻轻混匀，至到结晶*溶解再进行配制。

6、 试剂盒中部分试剂为储存液，客户需配置成工作液后使用，在配置过程中如因纯净水质量差或水质污染，以及实验中所用耗材洁净度差，可能造成实验结果不准确，甚至*错误，请使用双蒸水。

KK小鼠脂联素(ADP)科研elisa试剂盒订购说明

1.本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。

2.实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。

4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致 ELISA 实验结果偏差。

5.若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素 较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。

6.某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。

7.建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。