19221ES50 MolPure® 细胞/组织总RNA提取试剂盒
- 公司名称 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型号 19221ES50
- 产地 上海
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2024/9/4 17:26:02
- 访问次数 350
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供货周期 | 现货 | 规格 | 50T |
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货号 | 19221ES50 | 应用领域 | 生物产业 |
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit
产品描述
MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit采用MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱技术和和新型的溶液体系,适用于从多种新鲜或冻存的动物组织或培养细胞中高效率提取高纯度、高质量的总RNA。提取过程不需要用到有毒的酚、氯仿、β-巯基乙醇等有机溶剂,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便,15 min即可完成动物组织或细胞(10-30 mg动物组织或 (1-10)×106个动物细胞)总RNA的提取。试剂盒内的MolPure® DNA清除/RNA吸附通用柱可轻松过滤除去基因组DNA和高效吸附RNA。提取的总RNA纯度高,可用于RT-PCR、qPCR、分子克隆和RNase保护分析等多种分子生物学实验。
产品组分
编号 | 组分名称 | 19221ES08 (5 T) | 19221ES50 (50 T) |
19221-A | DNA清除/RNA吸附通用柱(MolPure® DNA removing/RNA binding Column A2) | 10个 | 100个 |
19221-B | 2 mL收集管 (2 mL Collection Tube A2) | 10个 | 100个 |
19221-C | 裂解液LB (LB Buffer A2) | 3 mL | 30 mL |
19221-D | 去蛋白液PL (PL Buffer A2) | 4 mL | 40 mL |
19221-E | 结合液BD* (BD Buffer A2*) | 1 mL | 10 mL |
19221-F | 漂洗液W* (Wash Buffer A2*) | 1.3 mL | 13 mL |
19221-G | RNase-free H2O | 1 mL | 5 mL |
运输和保存方法
常温运输。室温避光保存,有效期24个月。2-8℃可保存更长时间。
注意事项
1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
2. 注意观察各溶液是否有析出或浑浊(尤其冬季等室温为低温环境时),可37℃温浴复溶至溶液澄清,避免影响使用效果。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4. 本产品仅作科研用途!
实验前准备
1. 自备设备和试剂:台式离心机、水浴锅或金属浴,1.5 mL RNase-free离心管,液氮,无水乙醇等。
2. 本试剂盒可以抑制RNase活性,不需要低温离心,所有的离心步骤常温进行。
3. 使用前,在结合液BD*(19221-E)瓶中加入标签量的无水乙醇(5 T/50 T分别加入2.4 mL/24 mL无水乙醇),充分混匀后使用,并做好标记。
4. 使用前,在漂洗液W*(19221-F)瓶中加入标签量的无水乙醇(5 T/50 T分别加入5.2 mL/52 mL无水乙醇),充分混匀后使用,并做好标记。
操作方法
一、样本预处理
针对动物组织:新鲜组织(< 20 mg)加入350 μL裂解液LB,用玻璃匀浆器或电动匀浆器将组织研磨均匀。若用液氮研磨,需磨成细粉后再加入对应量的裂解液LB,剧烈震荡20 s,充分混匀。
针对贴壁细胞:不需消化,直接裂解;或离心收集细胞后,加入350 μL裂解液LB (< 5×106个细胞),用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。
针对悬浮细胞:直接离心收集细胞,加入350 μL裂解液LB (< 5×106个细胞),用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。
【注】:组织量20-30 mg加入600 μL裂解液LB
【注】:(5-10)×106个细胞加入600 μL裂解液LB
二、RNA提取
1. 将处理好的匀浆液加到DNA清除/RNA吸附通用柱上(柱子放在2 mL收集管内),13,000 rpm离心1 min,收集含有RNA的滤液。
2. 精确估算滤液体积中加入等体积的结合液BD*(请先确认已加入无水乙醇!),立即轻柔吹打混匀。
3. 将上述混合液全部加入新的DNA清除/RNA吸附通用柱中,13,000 rpm离心30 s,弃掉滤液。
4. 加入700 μL去蛋白液,室温30 s,13,000 rpm离心30 s,弃掉滤液,将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管中。
5. 加入500 µL漂洗液W*(请先确认已加入无水乙醇!),13,000 rpm离心30 s,弃掉滤液。
6. 重复一遍步骤5,将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管内。
7. 空柱13,000 rpm离心2 min,除去残留漂洗液W*。
8. 将DNA清除/RNA吸附通用柱放入新的1.5 mL RNase-free离心管中,在膜中央加入30-50 µL RNase-free H2O,室温放置1 min,然后13,000 rpm离心1 min,收集滤液,即为RNA溶液。样品可置于-80℃长期保存。
【注】:可通过以下方式提高回收产量:①65℃预热RNase-free H2O;②将RNA滤液再次上柱,室温放置1 min后,洗脱。
HB230110