川貝母檢測試劑盒
- 公司名稱 上海睿玥實驗器材有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 中國
- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/1 9:14:07
- 訪問次數(shù) 2091
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供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 環(huán)保,食品,農(nóng)業(yè),石油,制藥 |
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PCR-RFLP 反應
PCR反應體系:在 200ul離心管中進行,反應總體積為30ul, 反應體系包括2XPCR預混液15ul,鑒別引物(30umol/L)各0.5ul,模板 l ul,無菌超純水13ul。將離心管置PCR儀,PCR反應參數(shù):95°C 預變性4分鐘,循環(huán)反應30次(95°C 30秒,55?58°C ,72°C 3 0 秒 ),7 2 °C延 伸 5 分 鐘 。 取 P C R 反 應 液 ,置 500ul離心管中,進行酶切反應,反應總體積為20ul,反應體系包括10X酶切緩沖液2ul,PCR反應液6ul,Sma I(10U/M1) 0.5ul,無菌超純水11.5ul,酶切反應在30°C水浴反應2小 時。另取無菌超純水,同法上述PCR-RFLP反應操作,作為空白對照。
電泳檢測照瓊脂糖凝膠電泳法(中國藥典2020年版通則0541)
膠濃度為 1.5%,膠中加入核酸凝膠染色劑GelRed;供試品與對照藥材 酶切反應溶液的上樣量分別為8ul, DNA分子量標記上樣量為 l ul (0.5ug/ul)。電泳結束后,取凝膠片在凝膠成像儀上或紫外透射儀上檢視。供試品凝膠電泳圖譜中,在與對照藥材 凝膠電泳圖譜相應的位置上,在100?250bp應有兩條DNA 條帶,空白對照無條帶。