亚洲AV成人片无码网站玉蒲团,男人10处有痣是富贵痣,AV亚洲欧洲日产国码无码苍井空,日韩午夜欧美精品一二三四区

官方微信|手機版

產品展廳

產品求購企業資訊會展

發布詢價單

化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑>CR3002 快速T4 DNA連接酶 T4 DNA Ligase (Rapid)

分享
舉報 評價

CR3002 快速T4 DNA連接酶 T4 DNA Ligase (Rapid)

參考價460.00
具體成交價以合同協議為準
規格
200000U460.00元100 支可售

聯系方式:尤女士查看聯系方式

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!




賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司于2018年9月成立,位于中關村科技園區昌平園,專注于蛋白質組學、細胞生物學技術和產品的開發及應用。


賽爾瑞成(CRGEN)有專業的分子生物學平臺、原核發酵平臺、哺乳動物細胞培養平臺、蛋白純化和制劑平臺,并配備了500平米GMP級潔凈間及相關儀器設備。賽爾瑞成(CRGEN)可為客戶提供優質的重組蛋白、多肽、多克隆抗體、單克隆抗體、基因工程抗體(包括納米抗體、單鏈抗體、雙特異抗體等)研發服務,以及細胞分離、培養、凍存等細胞生物學相關生物學試劑產品和技術服務。


賽爾瑞成(CRGEN)匯聚了一批分子生物學、免疫學、細胞生物學、生物工程等方面的專家,技術團隊成員均來自國內外科研院所和生物技術企業,擁有雄厚的研發實力和產品開發經驗。且技術團隊常年從事抗體和重組蛋白的開發工作,曾承擔國家“863”計劃項目、國家重大新藥創制項目、國家自然科學基金項目、省級科技攻關計劃項目等,每年為客戶提供200多種重組蛋白和重組抗體定制服務,開發的無血清細胞凍存液、GMP級細胞因子和重組蛋白、分子生物學等產品已廣泛應用于科研領域。


賽爾瑞成(CRGEN)作為蛋白質組學和細胞生物學領域專業的技術服務和試劑產品優質供應商,期待與國內外用戶開展廣泛而深入地合作,共同推動生命科學的進步與發展。







無血清細胞凍存液,細胞因子,原核表達制備平臺,表達載體構建服務

純度 95% 供貨周期 現貨
規格 200000U 貨號 CR3002
應用領域 生物產業

產品概述 
T4 DNA Ligase催化雙鏈DNA或RNA上相鄰的5'-磷酸末端和3'-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化平齊末端或粘性末端之間的連接,還可以修復雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA 雜交雙鏈中的單鏈切刻。 

 

產品組分 
T4 DNA Ligase (Rapid) (2000 U/μl)

 

來源 
克隆有來自T4噬菌體DNA Ligase基因的重組E. coli菌株。

 

保存條件 
-30 ~ -15℃保存,≤0℃運輸。 

 

單位定義 
1單位指在50 μl 1 × T4 DNA連接酶反應緩沖液中,23℃反應條件下,30分鐘能使50% 的經HindⅢ消化的λDNA片段(100 ng)連接所需的酶量。 

 

反應緩沖液 
2× Rapid Ligation Buffer 
132 mM Tris-HCI pH 7.6 @ 25°C 
20 mM MgCl2 
2 mM DTT 
2 mM ATP 
15% PEG 6,000 
10 × T4 DNA Ligase Buffer 
500 mM Tris-HCI pH 7.6 @ 25°C 
100 mM MgCl2 
50 mM DTT 
10 mM ATP 

 

注意事項 
1. 建議插入片段與載體的摩爾比應在3:1 - 10:1。 
2. 平末端載體與片段進行連接時,應首先將載體進行去磷酸化處理,防止其自身環化。 
3. dA-Tailing產物與DNA Adapter的摩爾濃度比在1:10 - 1:20。 
4. T4 DNA Ligase不穩定,使用時冰上操作,用完立即放回-20℃。 

 

實驗案例1: DNA片段和載體DNA的連接 
1. 在微量離心管中配制如下連接反應體系: 

ddH2O

to 10 μl

10 × T4 DNA Ligase Buffer

1 μl

插入片段a

0.3 pmol

載體DNAb

0.03 pmol

T4 DNA Ligase (Rapid) (2000 U/μl)

0.5 μl

a. 插入片段與載體的摩爾比應在3:1 - 10:1。 
b. 平末端載體與片段進行連接時,應首先將載體進行去磷酸化處理,防止其自身環化。

2. 16°C過夜反應 
3. 轉化 
4. 將連接產物加入到100 μl感受態細胞中(連接產物的體積不應超過感受態細胞體積的1/6),輕輕彈勻,冰上孵育30 min。 
5. 將離心管置于42°C水浴,不要晃動,準確熱激90 sec后,立刻置于冰水浴中,靜置2 - 3 min。 
6. 向離心管中加入900 μl LB或SOC培養基,150 rpm,37°C振蕩培養45 min,使菌體復蘇,抗性基因表達。 
7. 5,000 rpm(2,500 × g)離心5 min,去掉900 μl上清。用剩余培養基將菌體重懸,用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10 min。 
8. 待菌液被平板吸收后,37°C倒置培養過夜。 

▲如果使用超級感受態細胞(轉化效率>10cfu/μg),可直接吸取100 - 200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4°C保存,一周之內都可重新涂板。 

 

實驗案例2: DNA文庫構建中接頭連接反應 
1. 在微量離心管中配制如下連接反應體系: 

dA-Tailing產物a

10 μl

2 × Rapid Ligation Buffer

15 μl

DNA Adapter b

2.5 μl

T4 DNA Ligase (Rapid) (2000 U/μl)

1 μl

ddH2O

1.5μl

用移液器輕輕吹打混勻 
a. 產物為5'端磷酸化,3'端帶dA的DNA片段。 
b. dA-Tailing產物與DNA Adapter的摩爾濃度比在1:10 - 1:20。 

 

2. 在PCR儀中進行連接反應: 

30°C

10 min

4°C

Hold

反應結束后,立即進行后續反應。 


產品目錄

貨號

產品名稱

規格

目錄價格

CR3001

T4 DNA Ligase (Rapid) 

(2000 U/μl)

40000U

125

CR3002

T4 DNA Ligase (Rapid)

 (2000 U/μl)

200000U

460

注:小包裝需加收干冰費用

 

 



 




化工儀器網

采購商登錄
記住賬號    找回密碼
沒有賬號?免費注冊

提示

×

*您想獲取產品的資料:

以上可多選,勾選其他,可自行輸入要求

個人信息:

溫馨提示

該企業已關閉在線交流功能