abs50059 2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit
參考價(jià) | ¥900.00-¥4200.00 |
- 公司名稱 愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司
- 品牌absin
- 型號(hào)abs50059
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間2024/7/9 10:04:21
- 訪問(wèn)次數(shù) 834
10mL | 900.00元 | 99 瓶可售 |
100mL | 4200.00元 | 99 瓶可售 |
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生化試劑,分子生物學(xué)試劑,血清,細(xì)胞培養(yǎng)試劑,化學(xué)試劑,免疫學(xué)試劑,耗材,儀器,定制服務(wù)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10ml;100ml |
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貨號(hào) | abs50059 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥,綜合 |
描述:
2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit是專門(mén)為類器官活性檢測(cè)研發(fā)的ATP檢測(cè)試劑盒,其發(fā)光技術(shù)原理是熒光素酶以熒光素、三磷酸腺苷(ATP)和O2為底物,在Mg2+存在時(shí),能將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。ATP既是熒光素酶催化發(fā)光的必需底物,又是所有生物生命活動(dòng)的能量來(lái)源。在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中,ATP 在一定的濃度范圍內(nèi),其濃度與發(fā) 光強(qiáng)度呈線性關(guān)系。
2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit采用生物發(fā)光(bioluminescent)法,利用 Firefly luciferase(螢火蟲(chóng)熒光素酶)催化底物—— 熒光素的轉(zhuǎn)化,高效利用ATP的能量,發(fā)射出光子。發(fā)光信號(hào)與存在的ATP量呈正比,而ATP與存在于類器官中的細(xì)胞數(shù)目直接呈正比。
本試劑盒為多孔板而設(shè)計(jì),是進(jìn)行自動(dòng)化高通量篩選(HTS) ,類器官增殖和毒性分析的理想選擇。均質(zhì)檢測(cè)步驟就是將單一試劑直接加入含有類器官培養(yǎng)基的孔板中,無(wú)需去除基質(zhì)膠。均質(zhì)檢測(cè)的"加樣-混合-檢測(cè)" 的操作方案使得類器官裂解和產(chǎn)生的發(fā)光信號(hào)與存在的 ATP 量成正比,而 ATP 量直接與類器官中的細(xì)胞數(shù)量成正比。特殊的均質(zhì)檢測(cè)方案避免了那些 需要多個(gè)步驟的ATP檢測(cè)方法可能會(huì)引入的誤差。
產(chǎn)品組成:
組分 | 10mL | 100mL | 保存方法 |
Organoid ATP 熒光染料 | 1支 | 10支 | 2-8℃,避光 |
Organoid ATP 染料buffer | 10mL | 10×10mL | 2-8℃,避光 |
注意:產(chǎn)品建議現(xiàn)配現(xiàn)用
產(chǎn)品特點(diǎn):
(1)簡(jiǎn)化了類器官活性檢測(cè)步驟:均質(zhì)的"加樣-混合-檢測(cè)"方案減少了其它同類檢測(cè)所需的操作步驟。
(2)類器官用量更少:可準(zhǔn)確地檢測(cè)到低于常用的比色法和熒光法的檢測(cè)低限的細(xì)胞數(shù)。減少了每個(gè)檢測(cè)反應(yīng)所需的細(xì)胞數(shù)。
(3)迅速獲得結(jié)果:加入試劑后10分鐘就能獲得數(shù)據(jù)。
(4)可自行選擇檢測(cè)方案:可用于多種類型的多孔板操作。可用發(fā)光檢測(cè)儀或CCD成像設(shè)備記錄數(shù)據(jù)。
(5)可連續(xù)處理培養(yǎng)板:發(fā)光信號(hào)穩(wěn)定,樣品可進(jìn)行批量處理。
使用方法:
1、類器官的準(zhǔn)備:
使用適合進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)的 96 孔板( 底和蓋子透明,孔壁不透,推薦貨號(hào):abs7242),每孔接種5ul-10ul類器官基質(zhì)膠混懸物,放培養(yǎng)箱半小時(shí)以上,待凝固后加入100ul類器官培養(yǎng)基(如使用 384 孔板,每孔接種2.5μl-4μl類器官基質(zhì)膠混懸物,具體用量視不同類型的 384 孔板而定),并確保檢測(cè)時(shí)每孔的細(xì)胞數(shù)量在 5 萬(wàn)個(gè)以內(nèi)(如使用 384 孔板宜控制在 1 萬(wàn)個(gè)以內(nèi)),同時(shí)設(shè)置不含類器官的基質(zhì)膠培養(yǎng)液孔作為陰性對(duì)照,按照類器官培養(yǎng)的常規(guī)方法培養(yǎng)類器官。如有需要,可加入藥物處理類器官。此外,如有必要,也可以設(shè)置類器官的濃度梯度,以便后續(xù)確定試劑盒的使用效果。
2、試劑準(zhǔn)備:
1管凍干粉加入1管10ml buffer里,混勻避光待用。
注:溶解后盡快使用,-80℃,避光保存,有效期一個(gè)月
(1)溶解 Organoid ATP 發(fā)光法檢測(cè)試劑,如有必要可適當(dāng)分裝該試劑。
(2)按照 96 孔板每孔 100μl (384 孔板每孔 25μl) 的量,取適量 Organoid ATP 發(fā)光法檢測(cè)試劑,平衡至室溫。
3、類器官活力檢測(cè):
(1)取出類器官培養(yǎng)板在室溫平衡 10 分鐘(通常不宜超過(guò) 30 分鐘)。
(2)將96孔板每孔里的類器官培養(yǎng)基去除,每孔加入 100μl Organoid ATP 發(fā)光法檢測(cè)試劑(384 孔板每孔 25μl)。
注:無(wú)需去除基質(zhì)膠。
(3)室溫劇烈振蕩(微孔板恒溫振蕩器,推薦貨號(hào):abs72034 )5min使類器官充分裂解。
(4)室溫(約 25℃)孵育 10 分鐘,使發(fā)光信號(hào)趨于穩(wěn)定。
(5)使用具有檢測(cè)化學(xué)發(fā)光功能的多功能酶標(biāo)儀進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)。請(qǐng)根據(jù)儀器要求設(shè)置相應(yīng)的參數(shù),每個(gè)孔的檢測(cè)時(shí)間一般為 0.25- 1 秒或更長(zhǎng)時(shí)間,具體需根據(jù)儀器的檢測(cè)靈敏度 進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。
(6)根據(jù)化學(xué)發(fā)光讀數(shù)直接計(jì)算類器官的相對(duì)活力,或根據(jù) ATP 標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出 ATP 的量從而 計(jì)算出類器官的相對(duì)活力。
注:檢測(cè)效果因類器官的種類不同而有所不同,對(duì)于一些 ATP 含量特別高的類器官,在細(xì)胞數(shù)量達(dá)到 50,000 個(gè)后可能會(huì)不呈線性相關(guān),但化學(xué)發(fā)光讀數(shù)還是會(huì)繼續(xù)升高。
注意事項(xiàng):
1 、熒光素酶的活性對(duì)溫度比較敏感,所以反應(yīng)前類器官和檢測(cè)試劑均需平衡至室溫后再進(jìn)行 測(cè)定。檢測(cè)試劑請(qǐng)混勻后使用。
2 、本試劑盒的檢測(cè)試劑中含有熒光素酶,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致其逐漸失活。為取得良好的使用 效果,第一次溶解后后可適當(dāng)分裝保存,但需注意分裝的容器不能有 ATP 污染。
3 、待測(cè)藥物的溶劑含量較高時(shí)可能會(huì)干擾熒光素酶反應(yīng),從而影響化學(xué)發(fā)光信號(hào)。可以通 過(guò)設(shè)置含有溶劑的類器官培養(yǎng)液對(duì)照孔排除溶劑的干擾。
4、檢測(cè)時(shí)須使用適合于類器官培養(yǎng)的白色或黑色的 96 孔板或 384 孔板。如果使用普通透明的 96 孔板或 384 孔板,相鄰孔之間會(huì)產(chǎn)生相互干擾。
5、本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品, 不得存放于普通住宅內(nèi)。
6 、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。