包涵體蛋白表達是一種在基因工程中常見的現象,主要發生在外源基因在原核細胞,尤其是大腸桿菌中高效表達時。在這種情況下,重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度(1.3 mg/ml)不溶性蛋白質顆粒,這些顆粒在顯微鏡下觀察時為高折射區,與胞質中其他成分有明顯區別。
包涵體的形成可能與多種因素有關,包括蛋白表達量過高、氨基酸組成、所處的環境以及蛋白的來源等。例如,當蛋白合成速度過快時,可能導致蛋白沒有足夠的時間進行正確的折疊,二硫鍵不能正確配對,進而導致蛋白質無法達到足夠的溶解度,最終形成包涵體。
由于包涵體中的蛋白是非折疊狀態的聚集體,因此不具有生物學活性。為了獲得具有生物學活性的蛋白質,包涵體的純化和復性過程至關重要。包涵體的純化主要包括樣本破碎、洗滌、溶解、復性、純化以及鑒定幾個步驟。其中,復性是一個非常復雜的過程,常用的復性方法包括稀釋復性、透析復性、凝膠過濾層析和離子交換層析等。
包涵體蛋白表達
- 公司名稱 蘇州珀羅汀生物技術有限公司
- 品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/12/9 15:38:27
- 訪問次數 241
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1ml |
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貨號 | PLDK001 | 應用領域 | 生物產業 |
您是否厭倦了花費數天時間進行轉化以及精細的細胞培養以獲得您感興趣的蛋白質?在這個時間就是金錢的快節奏世界中,您是否正在尋找具有成本效益的蛋白質生產平臺? 與傳統的基于細胞的方法相比,無細胞蛋白表達是加速您的研究開發的優質解決方案,使您節約控制成本并靈活調控反應參數,以更快、更有效方式的獲得目的蛋白產物。
“無細胞蛋白表達技術提供的純化蛋白質,在數量和速度上都超過常規方法。表達的每一種蛋白質都可以是一種治療候選物,并且可以使我們比以往快2個月生成數據包,同時節省資金。通過繼續使用無細胞蛋白技術,我們預期將可以在未來18個月內,節省一名全職員工約6個月的時間。” ——國外客戶對無細胞蛋白表達技術的評價。
PLD無細胞蛋白表達試劑盒依賴T7轉錄和大腸桿菌內源性翻譯機制。反應體系包含轉錄、翻譯、蛋白質折疊和能量再生所需的所有生物成分,例如核糖體、tRNA、分子伴侶、代謝酶、翻譯起始和延伸因子,試劑盒能夠以PCR產物、環狀質粒為模板,您只需將模板添加到其中即可實現目的蛋白質的快速、高效表達。
產品特色
快速:最快1小時即可檢測到目的蛋白,10小時蛋白合成達到峰值; | |
模板靈活:支持質粒模板以及PCR模板*; | |
表達量高:最高可實現3mg/mL以上產率的蛋白制備; | |
適用蛋白種類多:可表達各種類型的蛋白,包括富含二硫鍵的蛋白、膜蛋白等。 | |
操作簡單:一步反應,僅需將反應組分與DNA模板混合即可制備蛋白; | |
高通量:可在96孔板中進行表達篩選,當檢測到陽性表達后,可進行體系放大; | |
蛋白共表達:可在同一反應中,同時表達多種蛋白; |
產品組成
PLD無細胞蛋白表達試劑盒提供一種制備重組蛋白的方法,可輕松進行檢測和純化。該試劑盒提供的表達系統主要包含:
1、優化的大腸桿菌提取物,增加了DNA轉錄和翻譯過程中結構的穩定性,增加可溶性蛋白的產量;
2、優化的反應緩沖液,通過ATP再生系統持續為蛋白質合成提供能量;
3、優化濃度比例的氨基酸,為蛋白質合成提供充足的底物供應;
4、含GFP基因的優化表達載體,GFP作為陽性對照可以直觀觀測蛋白表達結果。
產品應用
PLD無細胞蛋白表達試劑盒可用于但不限于以下場景:
① 抗體發現與驗證
② 高通量篩選
案例數據
產品售價
名稱 | 貨號 | 規格* | 目錄價 | 適用場景 |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版) | PLDK001 | 1ml | ¥2120 | 大多數蛋白包括抗體、酶 |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(標準版) | PLDK001 | 10ml | ¥15900 | |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(增強版) | PLDK002 | 1ml | ¥3050 | 絕大多數蛋白,包括膜蛋白、全長抗體 |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(增強版) | PLDK002 | 10ml | ¥25200 | |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(全長抗體版) | AB01 | 1ml | ¥2440 | 全長IgG抗體、Fab抗體、抗體高通量篩選 |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(全長抗體版) | AB01 | 10ml | ¥20160 | |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(高通量版) | HTE01-050 | 50ml | ¥16667 | 高通量篩選 |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒(高通量版) | HTE01-050 | 1000ml | ¥100000 | |
其他規格 (20ml 、50ml、100ml、1000ml....) | 詢價 |
產品性能
試劑型號 | 線性模板支持 | 二硫鍵支持 | 產量 | 體系耐受性 | 通用性 |
PLDK001 | √ | √ | ★★★★ | ★★★ | ★★★★ |
PLDK002 | √ | √ | ★★★★★ | ★★★★★ | ★★★★★ |
PLD-AB01 | √ | √ | ★★★★ | ★★★ | ★★★ |
HTE01 | √ | √ | ★★★ | ★★★ | ★★★ |
產品清單
試劑 | 包裝 | 運輸 | 儲存 | ||
體積 | 1 mL | 10 mL | 50 mL | 干冰運輸 | -80℃ |
組分A | 20 rxns* | 200 rxns | 1000 rxns | ||
組分B | 20 rxns | 200 rxns | 1000 rxns | ||
陽性對照質粒(PC) | 4 μg | 10 μg | 20 μg |
*無細胞終反應體積按照50 μL/rxn計算。
反應體系參考
反應體系可根據實際需要按比例放大或縮小
試劑 | 用量 |
組分A | 20.5 μL |
組分B | 16.7 μL |
DNA模板 | 終濃度20 ng/μL |
ddH20 | 補至50 μL |
總反應體積 | 50μL |
推薦反應體積及對應反應容器
反應體積 | 反應容器 |
50 μL | 96孔板 |
100 μL | 48孔板 |
200-300 μL | 24孔板 |
500-1000 μL | 6孔板 |