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Mem-PER真核細胞膜蛋白抽提試劑盒

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       賽默飛世爾科技賽默飛世爾科技(紐約證交所代碼:TMO)是科學服務領域的世界領導者。公司年銷售額超過250億美元。在全球擁有約70,000名員工。我們的使命是攜手客戶,讓世界更健康、更清潔、更安全。我們幫助客戶加速生命科學領域的研究、解決在分析領域所遇到的復雜問題與挑戰,促進醫療診斷發展、加速藥物上市進程、提高實驗室生產力。我們全球超過75,000名賽默飛員工將借助于一系列行業領先的品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific、Unity Lab Services和Patheon,為客戶提供另想的創新技術、便捷采購方案和全方位服務。

      欲了解更多信息,請瀏覽公司網站:www.thermofisher.com 賽默飛世爾科技中國簡介賽默飛世爾科技進入中國發展已超過35年,在中國的總部設于上海,并在北京、廣州、香港、成都、沈陽、西安、南京、武漢、昆明等地設立了分公司,員工人數約為5000名。我們的產品主要包括分析儀器、實驗室設備、試劑、耗材和軟件等,提供實驗室綜合解決方案,為各行各業的客戶服務。為了滿足中國市場的需求,現有7家工廠分別在上海、北京、蘇州和廣州等地運營。我們在全國還設立了8個應用開發中心以及示范實驗室,將世界級的前沿技術和產品帶給中國客戶,并提供應用開發與培訓等多項服務;擁位于上海的中國創新中心,擁有有100多位專業研究人員和工程師及70多項專利。創新中心專注于針對垂直市場的產品研究和開發,結合中國市場的需求和國外先進技術,研發適合中國的技術和產品;我們擁有遍布全國的維修服務網點和特別成立的中國技術培訓團隊,在全國有超過2600名專業人員直接為客戶提供服務。我們致力于幫助客戶使世界更健康、更清潔、更安全。

      欲了解更多信息,請登錄網站:www.thermofisher.com 全國服務熱線:021-61621892公司電子郵箱:sales.china@thermofisher.com

科學儀器

    傳統分離膜蛋白的方法繁瑣而耗時,并且都需要梯度分離和昂貴的超高速離心儀器。而Thermo Scientific Mem-PER真核細胞膜蛋白抽提試劑盒是一種快速、簡單、便宜的膜蛋白分離方法。使用該試劑盒的三種試劑可以從培養的哺乳動物、酵母細胞以及軟或硬的哺乳動物組織中抽提并選擇性地富集膜蛋白。
    產品特點:
    • 的降低了親脂(膜)蛋白組份中參雜的親水性蛋白的交叉污染(一般< 10%)。
    • 適用于多種培養的哺乳動物細胞、酵母細胞以及哺乳動物組織。
    • 與SDS-PAGE、蛋白免疫印跡, 蛋白定量分析等下游應用兼容(詳見相關產品)。
    • 提供簡單完整的方法,使用該方法可以在大約1小時以內從哺乳動物細胞、組織以及酵母細胞中分離膜蛋白。
    • 僅需臺式微量離心機和離心管。
    使用Thermo Scientific Mem-PER 真核細胞膜蛋白抽提試劑盒來溶解和分離酵母膜內蛋白(釀酒酵母菌株EGY-194)。向濕重大10-15mg的細胞沉淀中加入80μlMem-PER 試劑 A和100-150mg、尺寸為405-600μm的酸洗玻璃珠并在室溫渦旋10分鐘來破裂酵母細胞的細胞壁。短暫離心收集玻璃珠,然后將細胞裂解物轉移到新的離心管中并將離心管置于冰上。用720 μl Mem-PER試劑B和C洗滌收集的玻璃珠然后將洗滌液加入到細胞裂解液中并在冰上孵育30分鐘。樣本進行4-12%Bis-Tris凝膠電泳。
    分別對從大鼠肝(圖A)和大鼠心(圖B)制備的膜蛋白進行蛋白免疫印跡。利用蛋白免疫印跡對通過Mem-PER 試劑制備的疏水(膜蛋白)成分和相應的親水成分進行分析,分別對VDAC (31 kDa, Affinity BioRegeants),cellugyrin (29 kDa, BDTransduction Laboratories)及flotillin-1 (48 kDa, BD Transduction Laboratories)進行免疫印跡分析。M = 膜蛋白組份,H =親水組份。
    對Thermo Scientific Mem-PER 試劑溶解的蛋白進行分級。使用Mem-PER真核細胞膜蛋白抽提試劑盒對三種細胞系的蛋白進行溶解和抽提。每組疏水(膜蛋白)和親水組分均通過標準操作獲得,利用蛋白質免疫印跡分析四種細胞定位已知的蛋白。利用SDS-PAGE/蛋白質免疫印記分析對COX4進行分析之前,使用SDS-PAGE樣品制備試劑盒去除膜組分中的去垢劑。所有碎片組分中檢測到的蛋白污染量極低。縮寫: AchE = 乙酰酯酶, COX4 =細胞色素氧化酶4亞基,hsp90 =熱休克蛋白90, M = 可溶性膜蛋白組分,H = 親水性蛋白組分。
    參考文獻
    Chattopadhyay, K., et al. (2006).J. Immunol. 177, 3920-3929
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