北京京科瑞達科技有限公司生產的LC210
安捷倫XDB-C18液相色譜柱
安捷倫XDB-C18液相色譜柱
產品介紹
安捷倫 ZORBAX Eclipse XDB色譜柱 C18、C8、苯基和CN是為在寬pH范圍(pH2-9)獲得堿性、酸性和中性化合物良好的峰形而設計的。這一寬pH范圍實現了使用一個系列的色譜柱進行方法開發的靈活性。Eclipse XDB色譜柱可以用于低pH(2-3)的初始方法開發,且可提供所有類型化合物的高分離度和出色峰形。同樣的色譜柱還可用于中等pH(6-8)范圍的方法開發。在中等pH范圍,殘留硅羥基活性更大,造成峰拖尾的相互作用更容易發生。為了克服這些相互作用,Eclipse XDB采用的工藝進行超密鍵合和雙封端,以覆蓋盡可能多的硅羥基。結果得到了pH 2-9范圍內堿性化合物的出色峰形。Eclipse XDB色譜柱有C18、C8、苯基和CN鍵合相用于大多數分離的選擇性優化,還有StableBond,Bonus-RP和Extend-C18可提供更多的選擇性。
品牌 安捷倫 型號 Agilent XDB-C18 4.6×250mm 5μm
測量范圍 見資料 測量對象 見資料
控溫范圍 25(℃) 尺寸 150(mm)
重量 0.2(kg)
適用PH范圍2-9
對堿性、中性和酸性化合物在中等PH范圍內有出色峰形
超密鍵合和雙封端技術延長了柱子在中性PH條件下的壽命
穩定性提高
用3.5μm柱可實現快速分離
液質聯用儀使用經驗
一、做液質,加離子誘導劑得是揮發性的,生物堿用甲酸或乙酸
二、我認為要維護好儀器 首先流速不能過大,液質是不能承載過大流速的; 其次電壓不要加到極限,尤其是正負離子轉換時要適當調整; zui后是做完樣一定要及時沖洗和吹掃管路。
三、LC和MS的條件優化是成功的關鍵。
四、 1、由于液質的流速較小(ESI一般為0.2ml/min),所以配置樣品的溶劑強度不能太大,盡量小于起始比例,否則,會出現保留時間偏移等問題。 2、如果在液相上摸好的條件,注意尤其是流動相的組成要轉化成合適LCMS分析的。 3、磷酸鹽及其他不揮發緩沖鹽在離子源會沉淀并堵塞毛細管等,要更換成可揮發的有機緩沖鹽。 4、緩沖鹽會導致離子抑制,因此要控制緩沖液的強度,<10mM。 5、去污劑、表面活性劑會有離子抑制現象發生, 表面活性劑產生的加合物和離子簇會干擾質譜數據,因此作液質聯用儀時,不要使用洗滌劑清洗玻璃器皿等容器,如果一定要用,建議超聲清洗多次。
五、 要做好質譜的維護工作,就得從小處著手。比如分析的樣品必須要干凈,這樣既可以保護色譜柱,也可以防止污染質譜;分析了大量的生物樣品后,沖洗系統時,先用高比例的水相沖洗,把源也給洗一下,然后再換用高比例的有機相,這時要把柱后管路從源上拿下來,避免柱中的雜質給沖進質譜……細節很多很多,大家在日常應用中盡量注意和避免就可以了。
六、 做液質三年了,島津、waters、ABI和finigan的都摸過,經驗談不上,說點自己的注意點吧。 1.前處理:樣品一定要干凈,不管是為了質譜還是為了保護柱子,生物樣品提取的好些,如果直接沉淀,一定要注意,盡量高轉速12000rpm以上,低溫離心,離2次(保險一點),轉移樣品也要仔細,從中間慢慢吸,有時會有漂浮物,島津的質譜好像做直接沉淀的源比較容易堵,Waters的好些。 2.樣品濃度:質譜是靈敏度很高的儀器,進樣濃度一定不能太高,1-2ug/ml已經可以啦,太高的濃度對儀器來說比較容易造成殘留,而且定量也會不準啦。 3.流動相:流動相中盡量加易揮發的鹽,盡量不要加表面活性劑之類的,容易離子抑制,如果遇到離子抑制,可以試試把你的樣品峰往后推推或者改變提取方法,也可以試試用APCI源。如果你的液相是低壓混合的,盡量不要跑梯度,那樣很費時間,如果沒辦法,一針又要走很長時間的話,可以考慮切換,只測樣品出峰前后的那段時間,這樣可以保護質譜。但是如果你用粗柱子,較高流速的也可以考慮跑梯度,如API4000,但要盡量減小死體積。 4.沖洗:沖柱子自然不用說了,低有機相和高有機相分別沖一定時間(各至少半個小時以上吧),柱子保存在高有機相中。做完試驗,沖源也是很重要的,也是低有機相和高有機相沖,但是時間可以不用那么長,你可以先沖源再沖柱子,或者兩者分開沖,個人覺得分開沖好些,這樣柱子上的臟東西就不會進到源里面去啦。
沖源的時候氣可以關小些。
七、 1、樣品必須過0.22um濾膜過濾,不得有顆粒物; 2、上樣的溶劑,必須是色譜純,和你的流動相比例一致; 3、反相體系,不允許用正己烷之類極性弱的溶劑溶解樣品并上樣。 4、水,自然是純凈水了; 5、樣品不允許含有金屬離子、表面活性劑(不要用洗潔精洗瓶子)、磷酸鹽、硼酸鹽等不揮發鹽; 6、淋洗液緩沖溶劑必須用可揮發的,如乙酸、乙酸銨、氫氧化四丁基銨等,色譜純級別。 7、樣品pH5~7嚴禁含有無機或有機強酸強堿。 8、六通閥處變三通,把沒有信號的區域,切換到廢液,這樣減少源的污染 9、定期振氣、清洗離子源,換油。