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技術文章
RACE技術-漩渦振蕩器技術文章
點擊次數:4046 發布時間:2013-12-10
race技術-漩渦振蕩器技術文章
RACE(rapid-amplification ofcDNA ends)是通過PCR進行cDNA末端快速克隆的技術,
通過PCR技術實現的,無須建立cDNA文庫,可以在很短的時間內獲得有利用價值的
信息.一般分5-和3-RACE兩種.3-RACE較簡單,首先將mRNA或總RNA 用PolyT引物反轉
錄,根據一般基因具有polyA尾巴的特點,選用特異引物(根據已知序列設計)和PolyT引物
PCR即可.大多實驗者反映一次PCR可以搞定.5-RACE相對較難,目前流行幾種5-RACE.
其一為加接頭(傳統),根據接頭引物和自己設計特異引物PCR,可以設計巢式PCR二次擴
增.另外,有利用反向PCR技術,連接成環在PCR.還有,GENE公司一種smart RACE PCR,利
用反轉酶末斷加C特點,直接加上多G接頭,轉換模板而無需用連接酶加接頭.