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豆粕中的粗蛋白含量檢測方案

一．原理

凱氏法測定樣品中的含氮量，即在催化劑作用下，用硫酸破壞有機(jī)物，使含氮物轉(zhuǎn)化成硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，測出氮含量，將結(jié)果乘以換算系數(shù)6.25，計算出粗蛋白含量。

二．試劑

1. 硫酸：分析純，含量為98%，無氮。
2. 催化劑：（硫酸銅：硫酸鉀為1:10的混合物）
3. 40%的氫氧化鈉
4. 2%的硼酸+甲基紅和溴甲酚綠混合的顯色劑
5. 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：c(HCL)=0.1mol/L。8.3ml鹽酸（分析純），注入1000ml蒸餾水中。
6. 硼酸吸收液：2%硼酸溶液（20 g/L）：稱取100 g硼酸，加水溶解后并稀釋至5000 mL。加入（1：3.5混合指示劑6ML）搖勻，再加入5%的氫氧化鈉稀釋溶液0.35ML搖勻，顏色呈紫紅色。
7. 蒸餾水

三．儀器設(shè)備

1. 樣品：豆粕粉末
2. 萬分之一天平
3. 紅外石英消化爐SKD-08S2
4. 容量瓶100ml
5. 滴定管：10、25ml
6. 消化管：300ml
7. 全自動凱氏定氮儀SKD-1000
8. 自動定氮儀SKD-800

四．分析步驟

1. 樣品的消化

稱取樣品0.2g和0.6g各3各(含氮量5~80mg)準(zhǔn)確至0.0002g，放入消化管中，加入5g混合催化劑，與樣品混合均勻，再加入10ml硫酸，將消化管置于消化爐上加熱，直至呈透明的藍(lán)綠色，然后在繼續(xù)加熱，至少30分鐘。

1. SKD-08S2消化爐
2. 6個樣品和2個空白）
3. ”SET”鍵+“A/M”鍵3秒，跳出第二設(shè)置區(qū)程序參數(shù)修改界面。連續(xù)按“SET”鍵數(shù)次出來
4. “RUN”=“3”，pro= “ 1 ”  ，再設(shè)置r1 =200，T1=5分鐘，c1=180度，r2=180，T2=5,C2=250度，r3=180， T3=5, C3=350度，r4=200，T4=60，c4=400，r5=0，T5=0,C5=0度。。。。r32=0,t32=0,c32=0,設(shè)置好后等幾秒鐘，程序會自動保存。
5. -----------程序自動運(yùn)行，自動結(jié)束。如果出現(xiàn)不運(yùn)行，再檢查“RUN”設(shè)置為“3”，pro= “ 1 ”  。

1. 樣品消化好后，冷卻至室溫。
2. 全自動定氮儀
3. 45ml，稀釋液40ml，標(biāo)準(zhǔn)酸HCL  0.1040（moL/L），蒸餾功率100%，蒸餾時間6分鐘，硼酸SKD-1000全自動定氮儀自動加。
4. 自動凱氏定氮儀
5. 45ml，稀釋液40ml，標(biāo)準(zhǔn)酸HCL 0.1040（moL/L），蒸餾功率100%，蒸餾時間6分鐘，加硼酸50ml
6.