目錄:北京索萊寶科技有限公司>>蛋白質(zhì)研究>>蛋白質(zhì)純化>> DS0101蛋白純化 親和層析柱1ml
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更新時(shí)間:2024-07-28 21:04:57瀏覽次數(shù):1572評(píng)價(jià)
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產(chǎn)品說(shuō)明
親和層析是利用生物分子間所具有的專一親和力而設(shè)計(jì)的層析技術(shù)。 它是利用生物分子間存在很多特異性的相互作用 (如抗原和抗體、 酶和底物或抑制劑、激素和受體等) ,通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中的一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上, 利用分子間親和力的特異性和可逆性, 對(duì)另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。
索萊寶提供的親和層析柱工具可應(yīng)用于如下方面:
①純化重組蛋白; ②純化抗原和抗體; ③純化多肽;④純化 DNA;⑤糖蛋白的純化;⑥純化磷酸化蛋白和肽;⑦DNA 結(jié)合蛋白的純化;⑧去除內(nèi)毒素,等。
親和層析柱空柱管的材質(zhì)為醫(yī)療級(jí)的聚丙烯, 這種工程材料通過(guò)大量的應(yīng)用證明具有清潔無(wú)毒,不與生物分子結(jié)合和低溶解度的優(yōu)點(diǎn)。
親和層析柱空柱所用的篩板是選用純凈的 UHWM-PE(超高分子量聚乙烯)為原料,經(jīng)*的工藝加工而成,具有親水性。篩板在裝填時(shí)安置在填料基質(zhì)的上下端,以阻擋昂貴的基質(zhì)滲出。親水性篩板采用了的親水性 UHWM-PE 生產(chǎn)技術(shù),該篩板能保證使用重力法時(shí)的流速為 1-2ml/分鐘或 1-2 滴/秒。同時(shí),該篩板和其它同類(lèi)產(chǎn)品相比,不會(huì)由于親水性基團(tuán)的引入而對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)生吸附。另外,該親水性篩板在使用過(guò)程中不易形成氣泡,氣泡會(huì)使流速降低,液體通過(guò)基質(zhì)不均勻。
二 、 產(chǎn)品應(yīng)用
1,抗體純化
純化抗體一般用 Protein A 作為純化的配體, 也可以用 Protein G 或 Protein L 或異源性抗體作為配體。
2,小分子物質(zhì)提取(以提取黃曲霉毒素 M1 為例)
試樣通過(guò)免疫親和柱時(shí),黃曲霉毒素 M1 被提取。 親和柱內(nèi)含有的黃曲霉毒素 M1 特異性單克隆抗體交聯(lián)在固體支持物上,當(dāng)樣品通過(guò)親和柱時(shí),抗體選擇性的與黃曲霉毒素 M1(抗原)鍵合,形成抗體一抗原復(fù)合體。用水洗柱除去柱內(nèi)雜質(zhì),然后用洗脫劑洗脫吸附在柱上的黃曲霉毒素 M1,收集洗脫液。用帶有熒光檢測(cè)器的高效液相色譜儀測(cè)定洗脫液中黃曲霉毒素M1 含量。
3,重組蛋白純化
近年來(lái),隨著生物技術(shù),特別是基因工程技術(shù)的迅猛發(fā)展,重組蛋白表達(dá)和純化越來(lái)越容易。 常用的重組蛋白表達(dá)策略是把蛋白與親和標(biāo)簽融合表達(dá), 利用親和標(biāo)簽一步純化出目標(biāo)蛋白。 此方法無(wú)需了解蛋白質(zhì)的生化特性或生理活性, 就可通過(guò)帶標(biāo)簽的重組融合蛋白選擇性地與層析基質(zhì)上的配體結(jié)合, 從而得以純化任何蛋白質(zhì)。 此方法與常規(guī)的層析方法不同之處在于, 無(wú)需針對(duì)不同的蛋白質(zhì)開(kāi)發(fā)特定的配體和方法。 采用保護(hù)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能完整性的溫和條件,可一步親和層析從粗提物中純化出重組蛋白,純度可達(dá) 90%以上。親和標(biāo)簽已成為后基因組學(xué)時(shí)代純化重組蛋白常用手段。親和標(biāo)簽系統(tǒng)一般具有以下特征:
(a)一步的吸附純化;(b)對(duì)三級(jí)結(jié)構(gòu)和生物活性影響小;(c)可方便且專一的去除以產(chǎn)生天然蛋質(zhì);(d)在純化過(guò)程中重組蛋白的分析簡(jiǎn)便準(zhǔn)確;(e)適用于大量的不同蛋白質(zhì)。但是沒(méi)有哪個(gè)標(biāo)簽是*的,只能根據(jù)實(shí)際需要去自己篩選,下表是分的標(biāo)簽以及純化的方案。
三 、裝柱步驟 :
1, 裝下篩板
把篩板浸泡于水中, 用超聲或振蕩趕掉篩板空隙中的空氣,備用。用裝柱工具把篩板頂入柱體,再用裝柱工具把篩板平推到柱體底部。
2, 加裝填料
將填料和適量的緩沖液加入小燒杯中,制成混懸液。蓋上柱體的下蓋,用吸管取混懸液加入柱體中,當(dāng)混懸液體積多于柱體體積時(shí),取掉下蓋放掉部分緩沖液,靜置使填料沉到柱體底部。
3, 裝上篩板
保持柱體垂直,用裝柱工具把篩板頂入柱體,再用裝柱工具把篩板平推到填料上表面,蓋上上蓋。
注意 :某些應(yīng)用需要在填料上表面和上篩板之間留適當(dāng)空隙。
蛋白純化 親和層析柱1ml訂購(gòu)說(shuō)明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái),再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái),再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
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