目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學(xué)>>DNA電泳>> E1170DNA電泳試劑 0.5M EDTA (PH8.0)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500ml |
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貨號 | E1170 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 乙二胺四乙酸別名EDTA,白色粉末。溶于氫氧化鈉、碳酸鈉和氨溶液等堿性溶液中,微 |
貨號 :E1171
規(guī)格 :100ml/500ml
保存 :常溫保存,有效期 1 年。
產(chǎn)品簡介 :
一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對含鈣組織好固定之后,再進(jìn)行脫鈣或二者同時進(jìn)行。然后進(jìn)行下游的實驗,如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。
EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結(jié)構(gòu)影響小,可以較好的保存組織的某些酶類, 經(jīng) EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周數(shù)月。
Solarbio EDTA 脫鈣液優(yōu)點:①經(jīng) EDTA 脫鈣的組織染色結(jié)果好;②對組織的結(jié)構(gòu)損害?。虎塾没瘜W(xué)方法測試可以確定脫鈣的終點。
Solarbio EDTA 脫鈣液缺點:①脫鈣速度很慢,不適合常規(guī)標(biāo)本脫鈣使用;②脫鈣后組織會稍微變硬。
操作步驟 :
1,骨組織脫鈣時,取材不易過厚,一般大約 5mm。
2,組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min。
3,組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min。
4,組織轉(zhuǎn)移 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中,脫鈣 10~30 天或更長時間。如果想加快脫鈣速度,可以置于 37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組織脫鈣 2 周~3 個月即可,每周更換一次,直終點。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在 200W 左右的檔位,每次加熱 5min,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù) 3~5min,中間間隔 3~5min。
5,用蒸餾水沖洗數(shù)次。
6,常規(guī)脫水、包埋。
注意事項 :
1,厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。
2,適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過 37~40℃,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于 60℃。
3,脫鈣應(yīng)*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。
4,脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5,骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進(jìn)行,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。
6,每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,避免脫鈣過度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影響染色結(jié)果。
7,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附錄 :
脫鈣終點的測定(物理法):采用針刺、手掐、鉗夾等方法,當(dāng)骨組織變軟或針刺時沒有阻力感即可終止
脫鈣。物理檢測法會對組織結(jié)構(gòu)有一定的損害, 盡量避免用力過大或反復(fù)檢測。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang,Ruo‐Lun Wei,Wei Du,Li‐Wei Zhang,Tao Du,Ya‐Dong Geng,Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:4.458 PMID:30924320
《Guangxi cobra venom-derived NGF promotes the osteogenic and therapeutic effects of porous BCP ceramic》 作者:Pan Jin, Fuqiang Yin, Li Huang, Li Zheng, Jinmin Zhao & Xingdong Zhang 期刊:Experimental & Molecular Medicine 影響因子:2.573 PMID:28386125
《Electrochemical gene sensor based on a glassy carbon electrode modified with hemin-functionalized reduced graphene oxide and gold nanoparticle-immobilized probe DNA》 作者:Yongkang Ye,Jiaona Gao,Hao Zhuang,Haisong Zheng,Hanju Sun,Yingwang Ye,Xuan Xu,Xiaodong Cao 期刊:Microchimica Acta 影響因子:5.705 PMID:
注意事項 :
1,厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。
2,適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過 37~40℃,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于 60℃。
3,脫鈣應(yīng)*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。
4,脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5,骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進(jìn)行,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。
6,每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,避免脫鈣過度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影響染色結(jié)果。
7,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附錄 :
脫鈣終點的測定(物理法):采用針刺、手掐、鉗夾等方法,當(dāng)骨組織變軟或針刺時沒有阻力感即可終止
脫鈣。物理檢測法會對組織結(jié)構(gòu)有一定的損害, 盡量避免用力過大或反復(fù)檢測。
DNA電泳試劑 0.5M EDTA (PH8.0)
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