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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化試劑>>氨基酸與蛋白質>> CA1610環狀七肽毒素 羅丹明標記鬼筆環肽

環狀七肽毒素 羅丹明標記鬼筆環肽
  • 環狀七肽毒素 羅丹明標記鬼筆環肽
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 CA1610
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-07-31 16:28:58瀏覽次數:1273評價

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環狀七肽毒素 羅丹明標記鬼筆環肽
貨號:CA1610
規格:300T
英文名稱 : TRITC Phalloidin
別名 : 羅丹明鬼筆環肽
分子式 : C60H70N12O13S2
分子量 : 1231.4
外觀(性狀) : 紫色粉末(凍干粉)
單位 : 瓶

環狀七肽毒素 羅丹明標記鬼筆環肽
貨號:CA1610
規格:300T
英文名稱 : TRITC Phalloidin 
別名 : 羅丹明鬼筆環肽 
分子式 : C60H70N12O13S2 
分子量 : 1231.4 
外觀(性狀) : 紫色粉末(凍干粉) 
單位 :

商品貨號:商品品牌:規格基本售價:選擇規格
CA1610-300TSolarbio300T1200.00元 

 

溶解性(Solubility):溶于DMSO、DMF、甲醇或者乙腈水溶液(20%)
多肽序列(Sequence):TRITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Trp-4-hydroxy-5-amino-Leu)(S-3 to 6)


背景描述
    鬼筆環肽(Phalloidin)是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)的環狀七肽毒素,以高親和力(Kd= 20 nM)選擇性結合于絲狀肌動蛋白F-actin,而不會與單體肌動蛋白G-actin結合,通常用來標記組織切片,細胞培養物或無細胞體系中的F-actin,從而對F-actin進行定性和定量分析。另外,鬼筆環肽衍生物也以相近的親和力結合于大小纖維,無論是動植物來源的肌肉細胞或非肌肉細胞,按照每一個肌動蛋白亞基約與一個鬼筆環肽分子的計量比結合。且非特異性結合幾乎可忽略,染色區域和非染色區域辨識度非常明顯。因此,鬼筆環肽衍生物特別適合替代肌動蛋白(Actin)抗體進行相關研究。另外鬼筆環肽衍生物很小,直徑約12-15?,分子量<2000 Daltons,未標記肌動蛋白(Actin)的許多生理特性都得以維持,比如,同肌動蛋白結合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能發生反應;鬼筆環肽標記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質;以及甘油抽提的肌纖維標記后仍可收縮等。

 

    鬼筆環肽(Phalloidin)的結合阻止絲狀肌動蛋白(微絲)的解離,穩定微絲結構,從而破壞微絲的聚合-去聚合的動態平衡。此特性使得肌動蛋白聚合發生的臨界濃度(CC)降<1μg/mL,因此,可用作一種聚合促進劑。此外,鬼筆環肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。

 

    本品為TRITC(四甲基異硫氰酸羅丹明)標記的鬼筆環肽,染色反應特異性強,對比性高,具有比Actin抗體更好的染色效果,適合用作F-actin的定性和定量檢測。另外,經本品結合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學特性。且本品的結合沒有物種差異性,適用性廣泛。

 

    我司提供儲存液形式(貨號:CA1610,濃度為20μM)的TRITC標記鬼筆環肽,用戶根據自身需求選擇。建議使用濃度為80~200nM。


運輸與保存方法

    冰袋運輸。-20℃避光干燥保存, 1年有效。

 

注意事項

1)鬼筆環肽具有毒性,需小心操作(對人的半數致死劑量LD50約2mg/kg)。

2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

需要自備材料

1)(可選)甲醇
2)1×PBS緩沖液, pH 7.4, 細胞培養(貨號:P1020)
3)固定液4%多聚甲醛(溶于PBS緩沖液)(貨號:P1110)
4)丙酮或透化液0.5% Triton X-100(溶于PBS緩沖液)
5)Fluoromount-GTM 水溶性封片劑(不含DAPI),DAPI
6)(可選)DAPI Fluoromount-GTM 水溶性封片劑(含DAPI)
7)(可選)BSA,標準
8)載玻片和蓋玻片
9)蓋玻片周圍密封液(如透明指甲油)
10)組裝有TRITC激發/發射濾片,以及DAPI激發/發射濾片的熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡

 

操作步驟

1. 工作液準備

    對于TRITC標記鬼筆環肽(貨號:CA1610,300T)

    本品以溶于甲醇的20μM儲存液形式提供,總量為300μl。按照100 nM的工作液濃度來換算,可制備總量為60 ml的工作液。建議收到產品后,根據單次使用量,對母液進行小量分裝,-20℃避光凍存,一年穩定。

    開始實驗前,使用1×PBS緩沖液稀釋儲存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為:80~200nM。工作液現配現用。

 

2.染色步驟

1)細胞爬片生長24h,使其密度達到50%匯合度。

2)吸掉培養液,37℃預熱的1×PBS(pH 7.4)清洗細胞2次。

3)使用溶于PBS的4%甲醛溶液進行細胞固定,室溫固定10min。

注意:避免固定劑中含有甲醇成分,因為甲醇在固定過程中可能破壞肌動蛋白。

4)室溫條件下,用PBS清洗細胞2~3次,每次10min。

5)室溫條件下,用丙酮(≤-20℃)脫水或者用0.5% Triton X-100溶液透化處理5min。

6)室溫條件下,用PBS清洗細胞2~3次,每次10min。

7)取200μl配制好的TRITC標記鬼筆環肽工作液,覆蓋住蓋玻片上的細胞,室溫避光孵育30min(通常情況下,4℃~37℃孵育皆可)。

注意:為了降低背景,可于TRITC標記的鬼筆環肽工作液內加入1% BSA;另外,孵育過程中為了避免溶液揮發,可將蓋玻片轉移到一個密封的容器內。

8)用PBS清洗蓋玻片3次,每次5min。

9)使用200μl DAPI溶液(濃度:100 nM)對細胞核進行復染,約30s。

10)用PBS清洗蓋玻片,然后倒置在已經滴有一滴Fluoromount-GTM 水溶性封片劑的載玻片上。使用紙巾輕輕檫掉多余封片劑,然后用指甲油*封片。此法制備的標本玻片可置于4℃避光保存,通常6個月內可繼續做F-actin染色分析。

注意:也可以直接使用含有DAPI的抗熒光淬滅封片劑(貨號:36308ES11)合并步驟9)10),簡化步驟。

11)熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進行熒光觀察,選擇TRITC激發/發射濾片(Ex/Em=545/570nm)和DAPI激發/發射濾片(Ex/Em=364/454nm)。

 

環狀七肽毒素 羅丹明標記鬼筆環肽訂購說明:

1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。 
2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后,將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運輸說明:

1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

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