目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-常量法>>脂肪酸代謝系列>> BC1080-50T/48S乙醇脫氫酶(ADH)活性檢測試劑盒 脂肪酸
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/48S |
貨號 | BC1080 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,綜合 |
主要用途 | 乙醇脫氫酶(ADH)活性檢測 |
乙醇脫氫酶(ADH)活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意:本產品試劑有所變動,請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號:BC1080
規格:50T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
提取液 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
粉劑一 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體45mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體6 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
提取液:臨用前將粉劑一倒入提取液中,溶液為懸濁液,使用前需搖勻;
試劑二:臨用取一支加入1.5mL蒸餾水,-20℃分裝保存4周,避免反復凍融。
產品說明:
ADH是生物體內短鏈醇代謝的關鍵酶,催化乙醇與乙醛可逆轉換,在很多生理過程中起著重要作用。哺乳動物ADH主要在肝臟生成,肝臟損傷導致ADH釋放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否異常。
ADH催化NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+,NADH在340nm處有吸收峰,而NAD+沒有;測定340nm 吸光度下降速率,來計算ADH活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
冰、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、水浴鍋、可調式移液器、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
實驗實例:
取0.1g大鼠肝臟按照提取和測定步驟操作,測得計算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001,ΔA測定管=A3-A4=0.812-0.587=0.225,按樣本質量計算酶活得:
ADH (U/g 質量) =1.61×(ΔA測定管–ΔA空白管)÷W=1.61×(0.225–0.001)÷0.1=3.6064U/g 質量。
取小鼠血漿直接檢測,測得計算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001,ΔA測定管=A3-A4=0.708-0.676=0.032,按液體體積計算酶活得:
ADH (U/mL) =1.61×(ΔA測定管–ΔA空白管)=1.61×(0.032–0.001)=0.04991 U/mL。
注意事項:
若A3大于1.5或者A3小于A1,則需要將樣本用蒸餾水稀釋再進行測定,計算公式注意乘以稀釋倍數。
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