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土壤幾丁質酶活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1930
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：自備甲苯。

2. 試劑三：懸濁液，使用前搖勻。

3. 試劑四為飽和溶液，低溫（2-8℃）取出可能會有晶體析出，加熱使其溶解即可。

4. 試劑五：臨用前取1瓶加入25mL試劑五B，充分溶解，現配現用。用不完的試劑2-8℃可以保存4周。

5. 標準液：5mg N-乙酰氨基葡萄糖。臨用前加入1mL試劑二配制成5mg/mL的標準溶液，即5000μg/mL的標準溶液，2-8℃可以保存4周。

產品說明：
幾丁質來源非常豐富，是自然界中僅次于纖維素的第二大類生物高聚物，由于其分解非常緩慢而大量堆積容易造成環境嚴重污染。幾丁質酶是影響土壤中氮礦化的一種重要的酶，其分解幾丁質控制著氮循環的關鍵步驟。
幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖，N-乙酰氨基葡萄糖與堿共熱產生的中間化合物可進一步反應產生顯色物質，該顯色物質在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、低溫離心機、可調式移液器、旋渦振蕩混勻儀、1mL玻璃比色皿、研缽、30-50目篩、甲苯（不允許快遞）、蒸餾水、水浴鍋/恒溫培養箱。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：

1. 反應結束后立即進行比色。

2. 試劑五有一定的毒性，實驗操作時做好個人防護。

3. 當A測定大于1時，建議將樣本上清液用試劑二稀釋后再進行測定。

實驗實例：

1. 取0.15g土樣1按照測定步驟操作，使用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.099-0.010=0.089，ΔA標準=A標準-A空白=0.705-0.009=0.696。根據公式計算酶活得：

土壤幾丁質酶活性（U/g 土樣）=39×ΔA測定÷ΔA標準÷W= 39×0.089÷0.696 ÷0.15=33.2 U/g 土樣。
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