目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC0065Na+k+ ——ATP酶活性檢測試劑盒 微量法
CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100管/48樣 |
貨號 | BC0065 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,綜合 |
主要用途 | 硝態氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,土壤中硝態氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其 |
Na+ K+-ATP酶活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號:BC0065
規格:100T/48S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 粉劑×2支 | -20℃保存 |
試劑四 | 液體2 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑五 | 液體3mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑六 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑七 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑八 | 液體5 mL×1瓶 | 常溫保存 |
標準品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
試劑三:臨用前取1支加1 mL蒸餾水溶解,現用現配。用不完的試劑-20℃分裝保存一周。
試劑六:用時加入5 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。
試劑七:用時加入5 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。
標準品:10 μmol/mL標準磷貯備液。將標準品20倍稀釋,即取 0.1 mL標準品加1.9 mL蒸餾水充分混勻,配成0.5 μmol/mL標準磷應用液,現用現配。
定磷劑的配制:按H2O:試劑六:試劑七:試劑八=2:1:1:1(體積比)的比例配制,配好的定磷劑應為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,定磷劑根據實驗用量現用現配。
注意:配試劑最好用新的燒杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
產品說明:
Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋/恒溫培養箱、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項:
1、由于每一個樣都必須做對照,本試劑盒100管保證測 48份Na+K+-ATP酶。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點。所以對測定所用試管要求嚴格無磷。
實驗實例:
取0.1g小鼠心臟加入1mL試劑一進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,之后用96孔板按照測定步驟操作,測得計算A測定=0.741,A對照=0.509,A標準=0.280,A空白=0.043,按樣本質量計算酶活得:
Na+K+-ATP酶活力(U/g 質量)=7.5×(A測定-A對照)÷(A標準-A空白)÷W=73.42 U/g質量。
取0.1g稗草加入1mL試劑一進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,之后用96孔板按照測定步驟操作,測得計算A測定=0.275,A對照=0.239,A標準=0.280,A空白=0.043,按樣本質量計算酶活得:
Na+K+-ATP酶活力(U/g質量)=7.5×(A測定-A對照)÷(A標準-A空白)÷W=11.39 U/g質量。
取100μL小鼠血漿檢測,用96孔板測得A測定=1.114,A對照=1.054,A標準=0.280,A空白=0.043,按液體體積計算酶活得:
Na+K+-ATP酶活力(U/mL)=7.5×(A測定-A對照)÷(A標準-A空白)=1.90 U/mL。
相關發表文獻:
Fangzhou Chen,Ying Zhao,Huizhao Chen,et aL. MicroRNA-98 reduces amyLoid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondriaL dysfunction through the Notch signaLing pathway via HEY2 in ALzheimer's disease mice. InternationaL JournaL of MoLecuLar Medicine. October 2018;(IF2.928)
[2] Wanxiu Cao,Jing Li,Yaoxian Chin,et aL. Transcriptomic anaLysis reveaLs effects of fucoxanthin on intestinal gLucose transport. JournaL of FunctionaL Foods. October 2018;(IF3.197)
[3] Li M, Jiang C, Zhang Y, et al. Activities of Amphioxus GH-like protein in osmoregulation: insight into origin of vertebrate GH family[J]. International journal of endocrinology, 2017, 2017.
參考文獻:
[1] Luo L G, MacLean D B. Effects of thyroid hormone on food intake, hypothalamic Na/K ATPase activity and ATP content[J]. Brain research, 2003, 973(2): 233-239.
[2] Cornelius F. Modulation of Na, K-ATPase and Na-ATPase activity by phospholipids and cholesterol. I. Steady-state kinetics[J]. Biochemistry, 2001, 40(30): 8842-8851.
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