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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>免疫學>>ELISA試劑盒>> SEKH-0008人白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒

人白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒
  • 人白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 SEKH-0008
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時間:2024-08-01 17:52:52瀏覽次數(shù):1630評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 96T
貨號 SEKH-0008 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè)
主要用途 人白介素2含量測定
Solarbio ELISA試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。人白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒是將抗人 IL-2單克隆抗體包被在酶標板上;分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本;洗板后加入生物素化抗人 IL-2抗體;洗板后加入HRP標記的鏈霉親和素,后,在λmax=450 nm處測定反應孔樣品吸光度,通過繪制標準曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計算出樣本中的濃度。?
 

人白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒

注意事項:
1.試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2.試劑盒未使用時應保存在2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3.試劑盒使用前請在室溫恢復30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4.在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持*。
5.為避免交叉污染,請在試驗中使用1次性試管,槍頭,封板膜(※)及潔凈塑料容器。.
6.濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶 蓋上,使用前請離心處理(5-10 S即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7.除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8.為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。

安全提示:
試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作人員在使用時請帶上手套并注意防護;在操作過程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請用大量清水清洗;檢測血液樣本及其它體液樣本時,請按國家生物實驗室安全防護有關管理規(guī)定執(zhí)行。

自備實驗器材(不提供,可代購)
1.酶標儀(主波長450nm,參考波長630nm)
2.高精度移液器及一次性吸頭:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
3.洗板機或洗瓶
4.37℃孵育箱
5.雙蒸水,去離子水,量筒等
6.稀釋用聚丙烯試管


人白細胞介素2(IL-2)ELISA試劑盒

樣本收集及儲存:
1.細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移無菌離心管,在4℃條件下1000 ×g離心10 min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入2-8℃儲存),避免反復凍融。
2.血清樣本:
室溫血液自然凝固20 min后,在4℃條件下1000×g離心10 min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3.血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合20 min,在4℃條件下1000×g離心10 min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入2-8℃儲存),避免反復凍融。

※注意:血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結(jié)果;如果樣本中的靶標物檢測濃度高于標準品的值,請將樣品做適當倍數(shù)稀釋后檢測,建議正式實驗前做預實驗以確定稀釋倍數(shù)。


IL-2 Human ELISA Kit

試劑準備:


1.試劑回溫:先在實驗前30 min將試劑盒,待測樣本放置于室溫下,濃縮洗滌液如出現(xiàn)結(jié)晶,請放入37℃溫浴直到結(jié)晶全部溶解。
2.配制洗滌液:預先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用雙蒸水或去離子水將20倍濃縮洗滌液稀釋成1倍應用液,未用完的濃縮洗滌液放入4℃冰箱保存。
3.標準品梯度稀釋:加入標準品/樣本稀釋液(SR1)1ml凍干標準品中,靜置15分鐘待其*溶解后輕輕混勻(濃度為1000pg/ml),然后按照以下濃度:250、125、62.5、31.25、15.62、7.81、3.9 pg/ml進行稀釋。復溶過的標準品原液(1000pg/ml)未用完的應廢棄或根據(jù)需要按照一次用量分裝,并將其貯存在-20~-80℃冰箱,具體如下圖。



4.生物素化抗體工作液:預先計算好試驗所需用量,用檢測稀釋液(SR2)將100倍抗體濃縮液稀釋成1倍應用工作液(稀釋前充分混勻),請在30分鐘內(nèi)加入到反應孔中。




 

5.酶結(jié)合物工作液:按每次試驗所需用量配制,用酶結(jié)合物稀釋液(SR3)將100倍濃縮酶結(jié)合物稀釋成1倍應用工作液(稀釋前離心),請在30分鐘內(nèi)使用。




6.洗滌方法:
?自動洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,注入洗滌液為300ul/孔,注與吸出間隔為30秒,洗板5次。
?手工洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,用洗瓶加入洗滌液300ul/孔,靜止30秒后甩凈酶標板孔中液體,在厚迭的吸水紙上拍干,洗板5次。


結(jié)果判斷:


1.用酶標儀 450 nm 波長測定 OD 值。選擇雙波長檢測,參考波長為 630 nm。如不能進行雙波長檢測,請用 450 nm 的OD測定值減去630 nm的OD測定值。
2.計算標準品、樣品的平均OD值:每個標準品和標本的OD值應減去零孔的OD值
3.以標準品濃度為橫坐標,吸光度OD值為縱坐標,用軟件繪制標準曲線,樣品中IL-2含量可通過對應OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
4.若標本OD值高于標準曲線上限,應做適當稀釋后重新檢測,計算濃度時再乘以稀釋倍數(shù)。

 

人白細胞介素2

參數(shù)表征

 

1. 數(shù)據(jù)及標準曲線

本圖僅供參考,應以當次試驗標準品繪制的標準曲線計算人IL-2的樣本含量

 

2. 靈敏度:

低可檢測人IL-2濃度達2pg/ml,20個零標準品濃度OD的平均值加上兩個標準差,計算相應的可檢測濃度。

 

3. 特異性:

不與人IL-2、4、6、8、10反應,小鼠IL-2、4、6、8等反應

 

4. 重復性:

板內(nèi),板間變異系數(shù)<10%

 5. 回收率:

在選取的健康血漿細胞培養(yǎng)上清中加入 3 個不同濃度水平的 IL-2,計算回收率。

6. 線性稀釋

分別在選取4 份健康血漿和細胞培養(yǎng)上清中加入高濃度 IL-2,在標準曲線動力學范圍內(nèi)進行稀釋,評估線性。

 

 

 

人白細胞介素2 ELISA KIT常見問題及解決方法

 

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