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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒-微量法>>微量法生化試劑盒>> BC0715-100T/96Sα-酮戊二酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

α-酮戊二酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
  • α-酮戊二酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號(hào) BC0715-100T/96S
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 產(chǎn)品資料 查看pdf文檔
  • 所在地 北京市
屬性

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更新時(shí)間:2024-08-02 10:06:28瀏覽次數(shù):2247評(píng)價(jià)

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CAS 詳詢 純度 詳詢
分子量 詳詢 分子式 詳詢
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號(hào) BC0715 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合
主要用途 α-KGDH酶活測(cè)定
儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
α-酮戊二酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法
有效期
6個(gè)月
單位

推薦
若使用96孔板測(cè)定,需使用96孔UV板,推薦貨號(hào)YA0602
英文名稱
α-Ketoglutarate Dehydrogenase(α-KGDH) Activity Assay Kit
別名
α酮戊二酸脫氫酶試劑盒 α-KGDH Kit α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)試劑盒 α酮戊二酸脫


α-酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng),請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)BC0715
規(guī)格100T/96S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體110 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體0.6 mL×2支-20℃保存
試劑三液體28 mL×1瓶2-8℃保存
試劑四液體0.5 mL×1支2-8℃保存
試劑五粉劑×22-8℃保存
試劑六粉劑×2-20℃保存
試劑七粉劑×2-20℃保存
試劑八粉劑×2-20℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑二:為易揮發(fā)試劑,用完后盡快密封,-20℃保存;

  2. 試劑五:臨用前取1支試劑五,加入1 mL試劑三,充分溶解,用不完的試劑2-8保存4周;

  3. 試劑六:臨用前取1支試劑六,加入1.5 mL試劑三,充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;

  4. 試劑七:臨用前取1支試劑七,加入1 mL試劑三,充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融(1支粉劑溶解后可做100T,為了延長(zhǎng)使用時(shí)間,此產(chǎn)品多給1支粉劑);

  5. 試劑八:臨用前取1支試劑八,加入0.4mL蒸餾水,充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復(fù)凍融;

  6. 工作液的配制:臨用前依次取8.05 mL試劑三、0.2 mL試劑四、1 mL試劑五、1.25 mL試劑六、0.5 mL試劑七(共11mL,約55T,充分混合待用,現(xiàn)用現(xiàn)配。

產(chǎn)品說(shuō)明:
α-KGDHEC 1.2.4.2)廣泛存在于動(dòng)物、植物微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,是三羧酸循環(huán)調(diào)控關(guān)鍵酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰輔*A
α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+和輔*A生成琥珀酰輔*A、二氧化碳和NADHNADH340nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96UV板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

  1. 測(cè)定過(guò)程中所有試劑和樣本在冰上放置,以免變性和失活。

  2. 比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過(guò)程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。

  3. 最好兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn),一個(gè)人比色,一個(gè)人計(jì)時(shí),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  4. 測(cè)定管的ΔA值在0.01-0.25之間,若測(cè)定管的ΔA值大于0.25,需將樣本進(jìn)行稀釋。

  5. 由于提取液中含有一定濃度的蛋白(約1mg/mL),所以在測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需要減去提取液本身的蛋白含量。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g稗草進(jìn)行樣本處理,將取上清稀釋2倍后按照測(cè)定步驟操作,使用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A4-A3=0.3243-0.3115=0.0128ΔA空白=A2-A1=0按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

α-KGDH活性(U/g 質(zhì)量)=1488.5×(ΔA測(cè)定-ΔA空白)÷W×2(稀釋倍數(shù))=381.056 U/g 質(zhì)量。

  1. 取0.1g小鼠肝臟進(jìn)行樣本處理,4 ℃ 11000g離心10min,取上清后按照測(cè)定步驟操作,使用微量石英比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A4-A3=1.2123-0.9623=0.2500ΔA空白=A2-A1=0按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

α-KGDH活性(U/g 質(zhì)量)=1488.5×(ΔA測(cè)定-ΔA空白)÷W=3721.25 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

  1. Jianyun Yue,Changjian Du,Jing Ji,et al. Inhibition of α-ketoglutarate dehydrogenase activity afects adventitious root growth in poplar via changes in GABA shunt. Planta. July 2018;(IF3.06)

  2. Xiao Li,Qi Zhao,Jianni Qi,et al. lncRNA Ftx promotes aerobic glycolysis and tumor progression through the PPARγ pathway in hepatocellular carcinoma. International Journal of Oncology. May 2018; (IF3.571)

參考文獻(xiàn):
Park L C H, Calingasan N Y, Sheu K F R, et al. Quantitative α-ketoglutarate dehydrogenase activity staining in brain sections and in cultured cells[J]. Analytical biochemistry, 2000, 277(1): 86-93.
相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC2150/BC2155 檸檬酸(CA)含量檢測(cè)試劑盒
BC0950/BC0955 琥珀酸脫氫酶(SDH)活性檢測(cè)試劑盒
BC0380/BC0385 丙 酮酸脫氫酶(PDH)活性檢測(cè)試劑盒
BC2160/BC2165 線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)活性檢測(cè)試劑

α-酮戊二酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法 α-酮戊二酸脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

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