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Lipofectamine 3000轉染試劑|
現在向您隆重介紹一種可處理zui難轉染細胞的通用型試劑。可憑借一種具有以下特性的試劑盒,解放那些您真正關心的生物相關細胞類型:
在難轉染細胞類型中具有廣泛的優良性能
Lipofectamine® 3000試劑充分利用了我們*的脂質體納米顆粒技術,實現了超高轉染性能和可重復的試驗結果。其可在zui廣泛的難轉染和通用細胞類型(圖1)中獲得非凡的轉染效率,同時提升細胞存活率。
圖1. Lipofectamine® 3000試劑勝過了Lipofectamine® 2000和FuGENE® HD試劑。每一種試劑均用于以96孔形式轉染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549細胞系,并在轉染后48小時分析GFP表達情況。在所有五種細胞系中,Lipofectamine® 3000都表現出了高于Lipofectamine® 2000和FuGENE® HD的GFP轉染效率。
圖2. 蛋白印跡分析顯示了HepG2細胞系中GST-STAT蛋白的表達。使用Lipofectamine® 2000試劑、Lipofectamine® 3000試劑、FuGENE® HD試劑(競爭產品1)和X-tremeGENE® HP試劑(競爭產品2)將GST-STAT質粒,在24孔板內轉染入細胞。在轉染后48小時,收集細胞并進行蛋白印跡分析。β-肌動蛋白轉膜圖代表四種樣品上樣量相等。 |
更高細胞活性,更低細胞毒性
在開發Lipofectamine® 3000時,我們對轉染過程的四個步驟進行了優化,同時結合了我們*的脂質體納米顆粒技術。其所具有的超高轉染效率使得我們可以減少試劑劑量,降低處理細胞時的潛在毒性風險。
圖3. 采用劑量的每種試劑,通過綠色熒光蛋白(GFP)表達載體,以96孔形式轉染HeLa細胞。在轉染后48小時,采用流式細胞儀進行分析,以測定百分比形式的轉染效率以及GFP表達強度。相對于Lipofectamine® 2000試劑和Lipofectamine® LTX試劑,Lipofectamine® 3000試劑表現出了更高的轉染效率和蛋白表達水平。 |
表1. 在一系列細胞系的測試中,Lipofectamine® 3000試劑獲得了超過Lipofectamine® 2000試劑的轉染效率。
細胞類型 | Lipofectamine® 3000試劑轉染效率 | Lipofectamine® 3000相對于 Lipofectamine® 2000試劑蛋白表達水平提高倍數 |
---|---|---|
3T3 | 4 | |
4T1 | 2 | |
A431 | 2 | |
A549 | 3 | |
ACHN | 2 | |
bEnd.3 | 9 | |
BJ | 3 | |
BT-549 | 4 | |
C2C12 | 3 | |
C6 | 5 | |
Caco-2 | 2 | |
Caki-1 | 4 | |
CHO-K1 | 1 | |
CHO-S | 1 | |
COLO 205 | 4 | |
COS-7 | 4 |
轉染效率 (%): <30% 30-50% 51-79% >80%
增強您的癌癥研究工作
使用生物相關性的細胞系,可為您的研究課題提供相關性的答案。Lipofectamine® 3000試劑適用于zui廣泛的細胞譜系且兼具較高的轉染效率,使您可以非常靈活地在研究中應用自己選擇的細胞。在一系列提取自不同組織的癌癥細胞中,Lipofectamine® 3000表現出了明顯高于Lipofectamine® 2000試劑等*轉染試劑的轉染性能。采用Lipofectamine® 2000試劑時,僅有25%的選定癌癥細胞系屬于易轉染(轉染效率超過50%)的細胞系,而采用Lipofectamine® 3000試劑時,則有60%的細胞系屬于易轉染細胞系。
表2. 在癌癥細胞系中,Lipofectamine® 3000試劑獲得了超過Lipofectamine® 2000試劑的轉染效率。
癌癥細胞系 | Lipofectamine® 3000試劑轉染效率 | Lipofectamine® 3000相對于 Lipofectamine® 2000試劑蛋白表達水平提高倍數 |
---|---|---|
Hs 578.T | 3 | |
SW480 | 2 | |
SK-MEL-28 | 2 | |
4T1 | 2 | |
RD | 4 | |
Saos-2 | 4 | |
PANC-1 | 3 | |
NCI-H23 | 2 | |
BT-549 | 4 | |
L6 | 8 | |
SK-OV-3 | 3 | |
DU 145 | 2 | |
HCC1937 | 5 | |
SW620 | 5 | |
MDA-MB-468 | 9 | |
NCI-H460 | 17 | |
Caki-1 | 4 |
轉染效率 (%): <30% 30–50% 51–79% >80%
圖4. 用Lipofectamine® 2000試劑和Lipofectamine® 3000試劑將GFP表達質粒轉染進17種細胞系中,采用24孔形式(以0.5 ?g質粒/孔的規格)和各試劑*的試驗方案。在轉染后48小時,分析GFP表達。每種條件均進行三次重復測試,圖中的數據點為平均轉染效率 + 標準偏差。 |
改善基因組編輯結果
開發Lipofectamine® 3000試劑,旨在突破輸送技術的界限,促進生物相關系統內的新技術發展,例如基因組編輯。通過這一新試劑,GeneArt® TAL和CRISPR可以靶向HepG2和U2OS細胞內的AAVS1位點,同時表現出更佳的轉染效率、平均熒光強度和基因組切割效果。這些改進之處有助于zui大限度減少繁重的下游工作,更便于進行干細胞處理,增強轉基因在細胞基因組中的位點特異性插入。
下載應用說明 >
圖5. GeneArt® TAL和CRISPR的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2細胞系中的AAVS1位點。采用GeneArt®基因組切割檢測試劑盒分析切割效率。
圖6. 使用CRISPR載體時的轉染效率和蛋白表達。該載體含有OFP報告基因,并采用Lipofectamine® 2000或Lipofectamine® 3000轉染試劑轉染到(A) U2OS和(B) HepG2細胞系中。柱狀圖所示為報告基因的表達。圖片所示為相應細胞表達OFP的熒光圖。
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