染色質免疫沉淀CHIP

實驗意義：

  染色體免疫沉淀技術(Chromatin immunoprecipitation assay, CHIP)是研究體內DNA與蛋白質相互作用的技術，用于闡明真核生物基因表達機制的基本途徑，CHIP可以檢測體內反式因子與DNA的動態作用，還可以研究組蛋白的各種共價修飾和基因表達之間的關系，在基因表達調控研究中發揮著重要的作用。CHIP是表觀遺傳信息研究的主要方法，是深入分析惡性腫瘤、癌癥、心血管疾病以及神經退行性疾病等病理診斷和基礎與臨床研究的有效工具。

實驗原理

  染色體免疫沉淀技術(Chromatin immunoprecipitation assay, CHIP)分析的是細胞內生理狀態下DNA結合蛋白與基因組DNA相互作用的技術，也稱作結合位點分析法，通常用于轉錄因子結合位點或者組蛋白特異性修飾位點的研究。基本原理是在活細胞的狀態固定DNA-蛋白質復合物，然后通過免疫學的方法沉淀復臺物，特異性地富集純化后，對其進行檢測，從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。后續的分析檢測可以通過定量PCR. Western Blot. CHIP-Seq. CHIP-chip (微陣列芯芯分析)。

實驗流程

1.甲醇固定細胞:

2.超聲破碎; .

3.目的蛋白的抗體孵育:

4.加入Protein A,結合抗體靶蛋白-DNA復合物，沉淀:

5.洗脫后得到室集的靶蛋白-DNA復合物;

6.分離富集的DNA和蛋白質:

7.分析檢測。

結果展示

實驗完成周期及交付標準

實驗周期: 1-3個月

交付標準: CHIP鑒定結果報告、 分析報告、實驗報告(試劑、耗材、實驗步驟)、原始數據等

實驗需與客戶確認的信息

1.目的基因與蛋白信息。

2、樣本類型與種屬

3、是否提供抗體

參考文獻

, ChIP seq Nomalzaion Reveals Global Modulalon ofte1otandoD Chen M, BrowmV : etl. CutEpigenomeUI Cll Reports, 2014. 91)131

實驗代做服務：