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分辨率的三種判據

2024-11-8  閱讀(370)

物鏡分辨率是指物鏡分辨兩個緊密相鄰特征的能力,理論上常用兩個可分辨的點光源之間的最小距離表示。點光源的圖像由于衍射不是一個亮點,而是一個延伸的光強輪廓。這種輪廓叫艾里斑,包含一個中心亮斑和一系列強度顯著減弱的明暗交替同心環。因此,兩個點光源的圖像是兩個有所重疊的艾里斑,而物鏡分辨率取決于兩者之間的最小可分辨距離。


雖然怎樣才能判定兩個艾里斑是可分辨的沒有基本的標準,但實際應用中仍有一些可供參考的判據。在顯微鏡成像中,常用的兩個判據是瑞利判據和阿貝判據。第三個是天文學常用的斯帕羅(Carrol Mason Sparrow)判據。


瑞利判據


瑞利判據指出,當一個艾里斑的第一個強度極小值剛好和另一個艾里斑的極大值重合時,這兩個艾里斑是可被分辨的。以中心極大值為圓心,第一個強度極小值位于半徑為1.22λf/D的圓環上,其中λ是光波長,f是物鏡焦距,而D是入瞳直徑。
如果以數值孔徑(NA)表示,瑞利分辨率為:
r(R) = 1.22λf/D = 0.61λ/NA
左下圖展示了間距等于瑞利分辨率的兩個理想艾里斑(假設照明光源為非相干光源),而右下圖是對應的光強曲線。通過兩條垂直的虛線可看出,每個艾里斑的大值剛好和相鄰艾里斑的小值重合。而且,兩個大值之間還有一個局部小值,清晰地出現在兩個白色光斑之間的灰色區域。

分辨率的三種判據

阿貝判據


在阿貝理論中,成像是一個雙重衍射過程。在這個理論框架中,為了分辨相距為d的兩個特征,要求是零級和一級衍射都能通過物鏡。因為一級衍射的角度為sinθ? = λ/d,所以兩個特征的最小間距(物鏡分辨率)為d = λ/(n·sinα),其中α是物鏡的孔徑半角,而n是成像介質的折射率。
上述結果是實際分辨率極限的2倍,因為它假設兩個一級衍射都要通過物鏡,但實際上只需要通過一個一級衍射和零級衍射。將上述結果除以2并代入NA的表達式可得出著名的阿貝分辨率:
r(A) = 0.5λ/NA
左下圖展示了間距等于阿貝分辨率的兩個理想艾里斑,而右下圖是對應的光強曲線。相比瑞利分辨率,原點處的極小值更難分辨很多,因為它只比兩個強度極大值低2%左右。

分辨率的三種判據

斯帕羅判據


對于瑞利和阿貝分辨率,兩個點光源的合成強度輪廓有一個小值,位于兩個大值中間的原點處。從某種意義上講,這正是兩個點光源得以分辨的原因。如果間距進一步減小,直至小于阿貝分辨率極限,這兩個單獨的極大值就將融合成一個中心大值而無法分辨。因此,斯帕羅分辨率判據指出,當中心從小值過渡到大值時,兩個點光源的間距達到可分辨極限。
在斯帕羅分辨率極限位置,合成強度輪廓的中心是平坦的,說明強度對位置的導數在原點處為零。但這不能判斷原點處的強度是極大值還是極小值。由于斯帕羅分辨率極限發生在原點強度從局部極小值過渡為極大值的時候,因此二次導數的符號必須從正變為負。
因此,斯帕羅判據是基于二階導數的。當原點處的二階導數為零時,分辨率達到極限。將此條件應用于兩個艾里斑的合成強度輪廓,可得到斯帕羅分辨率:
r(S) = 0.47λ/NA
左下圖展示了間距等于斯帕羅分辨率的兩個艾里斑,而右下圖是對應的光強曲線,其原點處沒有強度凹陷。

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