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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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翌圣Hieff Clone®系列克隆試劑盒，歷經(jīng)數(shù)次迭代與優(yōu)化，如今已囊括了從基礎(chǔ)克隆到高通量、高效能的一站式分子克隆系列解決方案，既含有用于載體構(gòu)建、基因突變等的通用型一步法快速克隆試劑盒，又含有用于測序、儲存DNA片段的通用型TOPO克隆試劑盒（兼容TA和平末端）。
翌圣分子克隆試劑盒操作步驟
翌圣Hieff Clone®系列克隆試劑盒自2017年誕生至今，客戶好評不斷，每年均有客戶使用克隆試劑盒產(chǎn)品發(fā)表高分文章，包括Nature、Cell等多個頂級期刊，獲得科研大牛們認(rèn)可！據(jù)統(tǒng)計，截至2024年10月31日，翌圣克隆試劑產(chǎn)品多年來累計參與發(fā)表文章173篇文章，累計影響因子達(dá)1388.86，包括一步法快速克隆試劑盒和TOPO克隆試劑盒。
最新通用型產(chǎn)品推薦
產(chǎn)品分類 | 產(chǎn)品定位 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 規(guī)格 |
快速克隆試劑盒 | 1-7片段一步法定向連接，最快5分鐘完成重組反應(yīng) | Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit | 10923ES20/50 | 20 T/50 T |
TOPO克隆試劑盒 | 兼容TA/平末端克隆 | Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit | 10906ES08/20 | 5 T/20 T |
通用型多片段一步法快速克隆試劑盒
小翌強烈推薦翌圣通用型多片段快速克隆試劑盒（Cat#10923ES），滿足6 μL小體系、10 ng低濃度載體與片段的連接，菌落數(shù)多，克隆陽性率高，客戶反饋效果好?。ㄓ掖辽暾堅囉? 試用裝申請）
一步法克隆與傳統(tǒng)酶切克隆方法的比較
方法 | 插入片段制備 | 酶切位點限制 | 通用性 | 連接時間 | 陽性率 |
一步法快速重組克隆技術(shù) | 1步純化 | 無 | ★★★★★ | 最快5 min | 高達(dá)95% |
酶切連接克隆技術(shù) | 2步純化 | 有 | ★★ | 過夜 | 不同基因差別大 |
優(yōu)勢性能
定向：可滿足1-7個DNA片段的定向無縫拼接
簡便：片段無需酶切，多片段連接一管內(nèi)即可完成
快速：最快5分鐘即可完成連接反應(yīng)
高效：克隆生長數(shù)多，克隆陽性率可達(dá)95%以上
廣泛：適用于任何載體，兼顧粘性和平末端；可用于多片段、點突變等的克隆
超長：載體片段連接長度可達(dá)25 kb以上
性能展示
單片段6 μL小體系高效重組
圖1. 在6 μL小體系非復(fù)蘇感受態(tài)下，連接10 ng低投入量單片段。結(jié)果顯示，10923ES性能好于競品，連接效率高，菌落數(shù)多，陽性率達(dá)100%。A-B：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（10 kb）和插入片段（1 kb）摩爾比為1:2。C：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES。
低濃度多片段高效重組
圖2. 分別連接低濃度的五片段和六片段。結(jié)果顯示，10923ES在低濃度下連接性能穩(wěn)定，菌落數(shù)多，陽性率100%。A-B：重組轉(zhuǎn)化平板。載體（11.6 kb）和插入片段（5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb）摩爾比為1:2。C-D：插入片段PCR鑒定電泳圖，M：Yeasen 10505ES，菌P長度2.6 kb。
客戶體驗反饋專區(qū)
01 高效、快速小體系單片段連接
圖3. Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit 10 μL小體系單片段連接和點突變克隆，陽性率100%。A&C：重組轉(zhuǎn)化平板。B：插入片段PCR鑒定電泳圖，泳道1-5分別為菌落1，菌落2，陰性對照，陽性對照（基因組作為模版），陽性對照（PCR純化片段作為模版）。D：插入片段PCR鑒定電泳圖。
02 高效、快速多片段連接
圖4. Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit多片段連接，陽性率100%。A&C：重組轉(zhuǎn)化平板。B：插入片段測序鑒定圖。D：插入片段PCR鑒定電泳圖。
通用型TOPO克隆試劑盒
小翌強烈推薦翌圣零背景通用型TOPO克隆試劑盒（Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit，Cat#10906ES），利用新一代拓?fù)洚悩?gòu)酶(Topoisomerase)的原理，搭配高效的平末端化因子，僅需5 min快速克隆連接平末端產(chǎn)物和粘性末端產(chǎn)物，操作簡單，連接效率高，克隆陽性率接近100%，客戶反饋效果好?。ㄓ掖辽暾堅囉? 試用裝申請）
TOPO克隆與傳統(tǒng)TA克隆方法的比較
方法 | 反應(yīng)時間 | 反應(yīng)溫度 | 體系組成 | 克隆陽性率 | PCR產(chǎn)物 |
TOPO克隆技術(shù) | 5 min | 室溫 | 載體+插入片段 | ★★★★★ | 載體無需加“A" |
傳統(tǒng)TA克隆技術(shù) | 過夜 | 16℃ | 載體+插入片段+T4連接酶 | ★★ | 需要加“A" |
優(yōu)勢性能
快速：僅需5分鐘即可完成連接反應(yīng)。
高效：無自連現(xiàn)象，陽性克隆率接近100%，無需設(shè)置藍(lán)白斑篩選。
連接片段：可連接150 bp-5 kb目的產(chǎn)物。
簡便：只需加入純化后目的片段即可。
兼容性廣：添加平末端因子，兼容TA克隆與平末端克隆。
性能展示
平末端/粘性末端片段高效連接
圖5. 相同體系下，分別投入200 bp粘性末端片段、1 kb粘性末端片段、2 kb平末端片段、4 kb平末端片段進(jìn)行連接，結(jié)果顯示，Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit試劑盒可以兼容粘性末端和平末端片段TOPO克隆。
客戶體驗反饋專區(qū)
平末端克隆高效連接
圖6. 3000 bp（120 ng）平末端片段連接，Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit連接效率高，菌落數(shù)多，陽性率100%。A：連接轉(zhuǎn)化平板。B：插入片段PCR鑒定電泳圖。
粘性末端片段高效連接
圖7. 100 bp-500 bp（50 ng）粘性末端片段連接，與進(jìn)口產(chǎn)品相比，10906ES連接效率高，菌落數(shù)多，4組樣品各挑10個單克隆，所有有效單克隆全為成功插入，陽性率100%。A&B：連接轉(zhuǎn)化平板。C：插入片段測序鑒定圖。
Hieff Clone®系列克隆產(chǎn)品近年來助力高分文章成果
2017年
研究團(tuán)隊：中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)創(chuàng)新中心陳玲玲課題組
發(fā)表期刊：Cell
影響因子：30.410
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® One Step Cloning Kit（該貨號已下架）
2018年
研究團(tuán)隊：浙江大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程與儀器科學(xué)學(xué)院
發(fā)表期刊：Molecular Cell
影響因子：14.548
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）
2019年
研究團(tuán)隊：中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)創(chuàng)新中心
發(fā)表期刊：Cell
影響因子：36.216
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® One Step Cloning Kit（該貨號已下架）
2020年
研究團(tuán)隊：北京工商大學(xué)植物資源研究與開發(fā)北京市重點實驗室
發(fā)表期刊：Nature Communications
影響因子：12.121
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit（Cat#10912ES）
2021年
研究團(tuán)隊：中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)創(chuàng)新中心
發(fā)表期刊：Molecular Cell
影響因子：17.970
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® One Step Cloning Kit（該貨號已下架）
2022年
研究團(tuán)隊：華東理工大學(xué)藥學(xué)院
發(fā)表期刊：Cell Metabolism
影響因子：31.373
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）
2023年
研究團(tuán)隊：中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)創(chuàng)新中心
發(fā)表期刊：Nature
影響因子：69.504
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）
2024年
研究團(tuán)隊：武漢大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院
發(fā)表期刊：Nature Microbiology
影響因子：30.964
翌圣產(chǎn)品：Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit（Cat#10911ES）
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品系列 | 產(chǎn)品定位 | 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
一步法快速克隆試劑盒 | 單片段一步克隆，已發(fā)文章累計IF達(dá)到1000+ | Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit一步法快速克隆試劑盒 | 10911ES20/50 | 20 T/50 T |
1-6片段一步克隆，最快5分鐘完成重組反應(yīng) | Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit通用型一步法快速克隆試劑盒 | 10922ES20/50 | 20 T/50 T | |
TOPO克隆試劑盒 | 替代TA連接克隆 | Hieff Clone® Zero TOPO-TA Cloning Kit | 10907ES20 | 20 T |
替代TA連接克?。ú缓?/span>MCS多克隆位點） | Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted | 10908ES20 | 20 T | |
替代平末端連接克隆 | Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit | 10909ES20 | 20 T | |
替代平末端連接克隆（不含MCS多克隆位點） | Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit, MCS-Depleted | 10910ES20 | 20 T | |
感受態(tài)細(xì)胞 | 5 min快速完成感受態(tài)轉(zhuǎn)化 | DH5α Fast Chemically Competent Cell F DH5α化學(xué)感受態(tài) | 11803ES80 | 10×100 μL |
常規(guī)感受態(tài)細(xì)胞 | 10 Chemically Competent Cell 10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 11801ES80 | 10×100 μL | |
常規(guī)感受態(tài)細(xì)胞 | DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 11802ES80 | 10×100 μL | |
常規(guī)感受態(tài)細(xì)胞 | BL21(DE3) Chemically Competent Cell BL21(DE3)化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 11804ES80 | 10×100 μL | |
高保真PCR | 5s/kb，保真保快 | 2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) | 10164ES03/08 | 1 mL/5×1 mL |
快速PCR | 快速PCR升級，可菌P且適用復(fù)雜模板擴(kuò)增 | 2×Hieff® Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix | 10167ES03/08 | 1 mL/5×1 mL |
