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20512ES08鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂
參考價: 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 20512ES08 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):1611更新時間:2022-02-10 11:56:39

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 20512ES08
應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
Streptavidin Agarose Resin 6FF是一種生物素或生物素化的蛋白、抗體等物質(zhì)的純化樹脂,其作用原理是基于鏈霉親和素與生物素之間的相互作用,將鏈霉親和素高度交聯(lián)于6%瓊脂糖上
產(chǎn)品介紹

Streptavidin Agarose Resin 6FF

鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂

 

產(chǎn)品信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

儲存

價格(元)

Streptavidin Agarose Resin 6FF 鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂

20512ES08

5 mL

4℃

1586.00

Streptavidin Agarose Resin 6FF 鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂

20512ES25

5×5 mL

4℃

6356.00

Streptavidin Agarose Resin 6FF 鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂

20512ES60

100 mL

4℃

16796.00

 

產(chǎn)品描述

 

Streptavidin Agarose Resin 6FF是一種生物素或生物素化的蛋白、抗體等物質(zhì)的純化樹脂,其作用原理是基于鏈霉親和素與生物素之間的相互作用,將鏈霉親和素高度交聯(lián)于6%瓊脂糖上,*的制備工藝使其具有更高的物理化學(xué)特性,可以耐受更高的壓力,在相對較高的流速下,實現(xiàn)對目的蛋白的純化,更適于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化。

由于鏈霉親和素與生物之間的親和力很強,純化時需要在變性條件下洗脫;而鏈霉親和素對亞氨基生物素的親和力相對較弱,可以在 pH 9.5-11.0 結(jié)合,pH 4.0 時洗脫,不需要使用變性劑,所以能更好的保持親和素偶聯(lián)物的活性。

 

產(chǎn)品性質(zhì)

 

基質(zhì)(Matrix)

高度交聯(lián)的6%瓊脂糖微球

配體(Ligand)

鏈霉親和素

粒徑(Bead size)

45-165 µm

載量(Capacity)

>200 nmol Biotin/mL介質(zhì)

大壓力(PressureMax

0.3 MPa3 bar

pH穩(wěn)定范圍(pH range)

2-10

儲存緩沖液(Buffer)

20%乙醇

 

運輸和保存方法

 

冰袋運輸。4℃保存,有效期2年。

 

需準(zhǔn)備試劑

 

所用水和Buffer在使用前///好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾除菌。

 

生物素或生物素化物質(zhì)的純化

結(jié)合/洗雜緩沖液:150 mM NaCl20 mM NaH2PO4pH 7.4

洗脫緩沖液:8 M鹽酸胍,pH 1.5

 

亞氨基生物素標(biāo)簽物質(zhì)的純化

結(jié)合/洗雜緩沖液:50 mM碳酸銨,0.5 M NaClpH 10.0

洗脫緩沖液:50 mM碳酸銨,0.5 M NaClpH 4.0

 

使用方法

【注】樣品在上樣前///好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾,減少雜質(zhì)以防阻塞柱子。另外,確保樣品溶液有合適的離子強度和pH值,可以用結(jié)合/洗滌緩沖液對血清樣品、腹水或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋,或者樣品用結(jié)合/洗滌緩沖液透析。

1 Streptavidin Agarose Resin 6FF的裝填(適用于各種中壓色譜層析柱的填裝)

1)用去離子水沖洗層析柱底篩板與接頭,確保柱底篩板上無氣泡,關(guān)閉柱底出口,并在柱底部留出1-2 cm的去離子水。

2)將樹脂懸浮起來,小心的將漿液連續(xù)地倒入層析柱中。用玻璃棒沿著柱壁倒入漿液可減少氣泡的產(chǎn)生。

3)如果使用儲液器,應(yīng)立即在層析柱和儲液器中加滿水,將進(jìn)樣分配器放置于漿液表面,連接至泵上,避免在分配器或進(jìn)樣管中產(chǎn)生氣泡。

4)打開層析柱底部出口,開起泵,使其在設(shè)定的流速下進(jìn)行。初應(yīng)讓緩沖液緩慢流過層析柱,然后緩慢增加至終流速, 這樣可避免液壓對所形成柱床的沖擊,避免柱床形成的不均勻。如果達(dá)不到推薦的壓力或流速,可以用所使用泵的大流速,這樣也可以得到一個很好的裝填效果。

【注】在隨后的色譜程序中,不要超過大裝柱流速的75%,當(dāng)柱床高度穩(wěn)定后,在后的裝柱流速下至少再上3倍柱床體積的去離子水。標(biāo)上柱床高度。

5)關(guān)閉泵,關(guān)閉層析柱出口。

6)如果使用儲液器,去除儲液器,將分配器至于層析柱中。

7)將分配器推向柱子至標(biāo)記的柱床高度處。允許裝柱液進(jìn)入分配器,鎖緊分配器接頭。

8)將裝填好的層析柱連接至泵或色譜系統(tǒng)中,開始平衡。如果需要可以重新調(diào)整分配器。

2樣品純化(以ÄKTA為例)

1)平衡:用5倍柱體積的結(jié)合Buffer平衡層析柱,使填料處于與目的蛋白相同的緩沖體系下,起到保護(hù)蛋白的作用。

2)上樣:將樣品加到平衡好的層析柱中,保證目的蛋白與樹脂充分接觸,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待檢測。

3)洗雜:用10-15倍柱體積的洗雜Buffer進(jìn)行清洗,去除非特異性吸附的雜蛋白,收集洗雜液,待檢測。

4)洗脫:使用5-10倍柱體積的洗脫緩沖液,收集洗脫液,即目的蛋白溶液。

5)清洗及保存:依次使用3倍柱體積的結(jié)合Buffer和5倍柱體積的去離子水平衡填料,后再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡,然后保存在等體積的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被細(xì)菌污染。

2 SDS-PAGE檢測

將純化過程中得到的樣品(包括原始樣品、流出組分、洗雜及洗脫組分等)利用SDS-PAGE進(jìn)行檢測,判定其純化效果。

【注】由于鹽酸胍的帶電性強,會中和SDS的電荷,影響后面蛋白在上樣緩沖液里的帶電性能,電泳時產(chǎn)生沉淀,導(dǎo)致無法電泳。因此后續(xù)可以對樣本進(jìn)行透析或者鹽析(透析可利用透析袋,PBS作為透析液,透析兩次,每次1小時,透析液的體積可控制在樣本的100倍)。

3 填料清洗

隨著非特異結(jié)合蛋白的增多和蛋白的聚集,會造成流速和結(jié)合載量性能下降,此時需對填料進(jìn)行清洗。

1)去除一些沉淀或變形物質(zhì)

用2倍柱體積的0.1 M NaOH或6 M鹽酸胍或8 M尿素溶液進(jìn)行清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH 7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì)

用3-4倍柱體積的70%乙醇或2倍柱體積1% Triton X-100清洗,然后立即用5倍柱體積的PBS,pH 7.4清洗。

 

注意事項

 

1)請勿冷凍保存本產(chǎn)品。

2)所有操作過程中,樣本需要在4℃或冰上操作。

3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

相關(guān)產(chǎn)品

 

20512ES08

Streptavidin Agarose Resin 6FF 鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂

5 mL

20513ES03

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML 生物素分子純化預(yù)裝柱,1ML

1 mL

20513ES08

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML 生物素分子純化預(yù)裝柱,1ML

5×1 mL

20514ES08

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 5ML 生物素分子純化預(yù)裝柱,5ML

5 mL

20514ES25

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 5ML 生物素分子純化預(yù)裝柱,5ML

5×5 mL

HB200817



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