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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1000 U |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 11068ES80 | 主要用途 | 用于RNA環化 |
產品介紹
T4 RNA Ligase 1 T4 RNA連接酶1
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
T4 RNA Ligase 1 T4 RNA連接酶1 | 11068ES80 | 1000 U | -20℃ | 565.00 |
T4 RNA Ligase 1 T4 RNA連接酶1 | 11068ES92 | 10000 U | -20℃ | 3465.00 |
產品描述
T4 RNA連接酶1是一種ATP依賴的、可催化ssRNA、ssDNA或單核苷酸分子之間或分子內5'磷酸末端和3'羥基末端形成磷酸二酯鍵的酶，該過程中ATP水解為AMP和PPi。本品來源于攜帶T4 RNA連接酶1基因的E.coli菌株。
產品應用
1. RNA 3'-末端標記
2. ssRNA和ssDNA分子內或分子間的連接
3. 合成單鏈寡脫氧核苷酸
4. RNA環化
產品組分
類別 | 編號 | 組分 | 產品編碼/規格 | 儲存 | |
11068ES80（1000 U） | 11068ES92（10000 U） | ||||
Part Ⅰ | 11068-A | T4 RNA Ligase (10 U/μL) | 100 μL | 1 mL | -20℃ |
Part Ⅱ | 11068-B | 10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer | 300 μL | 3 mL | -20℃或-80℃ |
11068-C | ATP (10 mM) | 50 μL | 500 μL | ||
11068-D | 50% PEG 8000 | 500 μL | 5 mL | ||
運輸方法
冰袋運輸。
保存方法
1. 試劑Part Ⅰ：-20℃保存，避免反復凍融。
2. 試劑Part Ⅱ：-20℃保存，1個月。-80℃，長期保存。避免反復凍融。
單位定義
37℃條件下，30 min內將1 nmol的5'-[32P] rA16 轉化成磷酸鹽不溶物所需要的酶量為1個酶活單位。
注意事項
可根據具體應用選擇合適的操作方法，可能需準備額外的試劑，如RNase inhibitor (Yeasen，Cat 0603)。
操作方法
一、用于RNA環化
1.配制反應體系（20 μL反應體系）
在RNase free離心管中配制如下混合液，用移液器輕輕吹打混勻。
組分 | 加入量（μL） | 終濃度 |
10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer | 2 | 1× |
50% PEG 8000 | 4 | 10% |
ATP (10 mM) | 0.04-0.1 | 20-50 μM |
RNase inhibitor (40 U/μL) | 0.5 | 1 U/μL |
RNA | - | 10 μM |
T4 RNA Ligase (10 U/μL) | 1 | 0.5 U/μL |
Nuclease-free water | Up to 20 | - |
【注】：1）試劑使用：使用前充分解凍混勻。
2）T4 RNA連接酶添加：建議在后一步加到反應體系中。
2.反應程序
1）孵育：25℃ 1-2 h。如果是更長的寡核苷酸，16℃過夜可以增加產量。
2）終止反應：95℃ 2 min或65℃ 15 min。
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HB170104
