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參考價(jià): | ¥ 625 |
訂貨量: | 1 件 |
- 2× Hieff Canace® 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):1115更新時(shí)間:2023-02-22 16:42:08
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 mL |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 10138ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 高通量測(cè)序領(lǐng)域中多重PCR文庫(kù)構(gòu)建 |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真pcr預(yù)混液(for Multiplex PCR ) | 10138ES03 | 1 mL | 625.00 |
10138ES08 | 5×1 mL | 2355.00 | |
10138ES25 | 25×1 mL | 4255.00 | |
10138ES50 | 50 mL | 8355.00 | |
10138ES72 | 250 mL | 38255.00 | |
10138ES76 | 500 mL | 72355.00 |
產(chǎn)品描述
2× Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真pcr預(yù)混液 (for Multiplex PCR)是基于新一代高保真DNA聚合酶Canace開(kāi)發(fā)的,針對(duì)于高通量測(cè)序領(lǐng)域中多重PCR文庫(kù)構(gòu)建應(yīng)用專門優(yōu)化的。Canace酶基于Pyrococcus furiosis DNA Polymerase,經(jīng)基因工程改造而成。其蛋白結(jié)構(gòu)包含5’→3’聚合酶結(jié)構(gòu)域和經(jīng)過(guò)改造的3’→5’外切酶結(jié)構(gòu)域。這種組合大幅度提升了酶的耐熱性,保真性。耐熱溫度達(dá)到98℃,保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,普通Pfu DNA聚合酶的6倍。酶溶液中添加了*的延伸因子,擴(kuò)增速度達(dá)到15 sec/kb。本產(chǎn)品為2×mix PCR混合液,可添加的模板、引物體積范圍大,使您的實(shí)驗(yàn)更加靈活(本公司另有5×mix可供選擇,Cat.10137)。
產(chǎn)品應(yīng)用
多重PCR文庫(kù)構(gòu)建。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存。有效期2年。
注意事項(xiàng)
1. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
2. 值得注意的是,多重PCR建庫(kù)實(shí)驗(yàn)本身具有一定的難度,通常需要進(jìn)行優(yōu)化,如您在使用本產(chǎn)品時(shí)遇到困難,可聯(lián)系我們的技術(shù)支持,我們有多重優(yōu)化方案,可幫助您更好的構(gòu)建實(shí)驗(yàn)體系。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途!
PCR反應(yīng)體系(推薦冰上配制)
組分 | 體積 μL |
ddH2O | to 50 |
DNA模板 | X |
Primer mix (X μM) | X |
2× Hieff Canace® PCR Master Mix (for Multiplex PCR) | 25 |
【注】:
1)試劑使用:使用前要充分解凍混勻。
2)引物與模板:第一輪多重PCR進(jìn)行target enrichment,其中的引物和模板條件需要自行摸索。
第二輪多重PCR引物的濃度建議使用:10 μM引物 加2 μL左右。
第一輪PCR擴(kuò)增程序:
循環(huán)步驟 | 溫度(℃) | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 98℃ | 3 min | 1 |
變性 | 98℃ | 20 sec | 15-45 |
退火/延伸 | 60℃ | 4-10 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】在PCR儀上設(shè)置上表中的反應(yīng)程序進(jìn)行多重PCR反應(yīng)(設(shè)置熱蓋溫度至105℃左右)。
退火/延伸時(shí)間:100重PCR推薦4 min;1000重推薦8-10 min需要自己根據(jù)引物情況摸索。
PCR產(chǎn)物磁珠純化
建議在50 μL 反應(yīng)體系中加45 μL磁珠(Cat:12601)進(jìn)行產(chǎn)物純化。
第二輪PCR擴(kuò)增程序:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 98℃ | 30 sec | 1 |
變性 | 98℃ | 15 sec | 25-35(可自行優(yōu)化) |
退火 | 60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 1 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】:退火溫度和時(shí)間:推薦使用60℃,也可根據(jù)需要,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時(shí)間設(shè)置為30 sec,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時(shí)間太長(zhǎng)可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。
PCR產(chǎn)物磁珠純化
建議在50 μL 反應(yīng)體系中加45 μL磁珠(Cat:12601)進(jìn)行產(chǎn)物純化。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Hieff® Multiplex PCR Kit(Mg2+ free) | 12278ES60/76 | 100/500 T |
Hieff® Multiplex PCR Kit | 12279ES60/76 | 100/500 T |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 12280ES60/76 | 100/500 T |
Hieff NGS® DNA Selection Beads 分選磁珠(替代AMPure XP Beads) | 12601ES03/08 | 1/5mL |
5×Hieff Canace® PCR Master Mix 高保真酶預(yù)混液(for multiplex PCR) | 10137ES03/08/25/76 | 1/5/25 mL |
HB210831