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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 13279ES50 | 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
Hieff® Multiplex PCR Kit
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
Hieff® Multiplex PCR Kit | 13279ES60 | 100 T | 875.00 |
Hieff® Multiplex PCR Kit | 13279ES76 | 500 T | 3165.00 |
產品描述
本產品適用于多重PCR實驗。Hieff® Multiplex PCR Kit以多重PCR酶制劑與2×擴增緩沖液為組分的試劑盒，可快速便捷地用于PCR反應，具備高均一性、高特異性和高靈敏度的特點，可以對20對及以上的引物特異、均一地進行擴增反應。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | |
13279ES60 (100 T) | 13279ES76 (500 T) | ||
13279-A | Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 100 μL | 500 μL |
13279-B | 2×Hieff® Multiplex PCR Buffer | 2×1.25 mL | 10×1.25 mL |
【注】:13279-A組分避免反復凍融。
運輸與保存
冰袋運輸。-20℃儲存，有效期1年。
反應體系
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer | 25 | 1× |
Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 1 | - |
Primer mix | x | 0.1 μM-0.5 μM |
模板DNA | DNA總量：1 ng-200 ng | - |
無菌超純水 | up to 50 | - |
【注】 1）上表中DNA量和引物濃度均為推薦濃度，可根據具體實驗情況進行調整適濃度。
2）每條引物的濃度可在0.1 μM-0.5 μM范圍內進行調整。
3）2×Hieff® Multiplex PCR Buffer中已經包含擴增所需要的Mg2+、dNTP、鹽離子等，無需額外添加。
擴增程序
循環步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 |
| 15-45 |
退火 | 50-60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
【注】 1）在PCR儀上設置上表中的反應程序進行多重PCR反應（設置熱蓋溫度至105℃左右）
2）使用本產品獲得的擴增產物無需添加上樣緩沖液，可直接上樣用于電泳檢測。
3）延伸時間以長擴增片段為準，可適當延長延伸時間，但要避免過長時間帶來的非特異性擴增。
實驗案例分享
以人基因組DNA為模板，使用10對引物進行多重PCR反應，分別擴增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。
反應體系配制
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hieff® Multiplex PCR Buffer | 25 | 1× |
Hieff® Multiplex PCR Enzyme | 1 | - |
Primer mix | 10 | 0.1 μM |
模板DNA | 1 | 2 ng/μL |
無菌超純水 | up to 50 | - |
擴增程序
循環步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94 | 1 min | 1 |
變性 | 94 |
| 35 |
退火 | 60 | 60 sec | |
延伸 | 72 | 60 sec/kb | |
終延伸 | 72 | 10 min | 1 |
電泳檢測
2%瓊脂糖凝膠；電壓130 V；電泳時間30 min。
實驗結果
M：100 bp DNA ladder
Lane1-2：10重PCR產物
HB200511
