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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品介紹
產品簡介
Nanobody-Tn5主要是將納米抗體與Tn5轉座酶進行融合，制備出可結合兩種不同物種（小鼠和兔）一抗的anti-mouse Tn5和anti-rabbit Tn5。這兩種nanobody-Tn5中包埋含不同index的接頭序列時，Tn5切割染色質即可將接頭插入到染色質中，通過不同的index來區分來源于mouse的一抗靶向區域還是來源于rabbit一抗靶向的區域。該產品為裸酶，需要自己組裝接頭序列。
產品信息
貨號 | 12595ES01/02/03 |
規格 | 10 μL/ 80 μL/ 100 μL |
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 12595ES01 | 12595ES02 | 12595ES03 |
12595-A | Anti-mouse Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
12595-B | Anti-rabbit Tn5 | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
12595-C | Assemble buffer | 10 μL | 80 μL | 100 μL |
儲存條件
-85~-65℃保存，有效期1年。
使用說明
以高通量測序建庫為例，在使用前，請務必仔細閱讀使用說明。
接頭制備
1）Illumina平臺參考引物名稱及序列：
Primer A-1：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3' Primer A-2：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Primer A-3：5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer B：5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer C：5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2）將Primer A、Primer B、Primer C溶解至200 μM。
3） 分別配制如下反應體系：
組分 | 反應1 |
Primer B（200 μM） | 10 μL |
Primer C（200 μM） | 10 μL |
total | 20 μL |
組分 | 反應2 |
Primer A-1 or A-2 or A-3（200 μM） | 10 μL |
Primer C（200 μM） | 10 μL |
total | 20 μL |
4）分別將反應1和反應2渦旋振蕩充分混勻，并短暫離心使溶液回到管底。置于PCR儀內，進行如下反應程序：熱蓋105℃ On，94℃加熱2 min。時間到后，停止反應程序，不要打開熱蓋，讓PCR管在PCR儀器中自然冷卻2 h，然后再于4℃中放置5 min。
5）反應結束后，將反應1和反應2等體積混合，混勻。命名為Adapter Mix，-25~-15℃保存。
2．轉座子生成
1） 配置以下反應體系：
組分 | 體積（μL） |
Anti-mouse Tn5 or Anti-rabbit Tn5 | 10 |
Adapter mix (50 μM) | 0.5 |
Assemble Buffer | 0.5 |
2）反應條件：使用移液器輕輕吹打充分混勻。置于25℃反應1 h（熱蓋關閉）。反應產物可直接應用于建庫實驗，或-25~-15℃保存。
注意事項
1. 轉座酶對溫度敏感，建議盡快完成接頭包埋，生成的轉座子可于-25~-15℃保存，有效期1年。
2. 本產品僅作科研用途。
3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
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