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制備液相知多少

閱讀：3219發布時間：2021-4-15

 

01
色譜分析的目的：
 
分析色譜的目的，是分析出混合物中一個（或者幾個）純物質的含量；制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質。
為了加快分離的時間與提高分離的效率，制備色譜的的進樣品量很大，導致制備色譜柱子的分離負荷的相應加大，也就必須使用加大填料的色譜柱，增大制備色譜的直徑和長度，使用的相對多的流動相。然而，當色譜柱上樣品負載加大的時候，往往導致柱效急劇下降而得不到純的產品。制備色譜，要解決容量與柱子效果之間的矛盾，對重現性也要考慮。從經濟上來說。制備色譜要爭取少用填料，少用溶劑，要盡可能多的得到產品。

 

02
樣品的前處理：
 
制備色譜柱子由于處理的樣品多，比分析柱子更容易受污染，所以，必要的前處理就顯得非常的必要。萃取、過濾、結晶、固相萃取等簡單的分離方法，如果用得上，而且還不是很麻煩，就要盡可能多的采用以去掉雜質。

 

03
制備色譜柱的材質及其特點：
 

各種規格的玻璃柱子在實驗室里頭很容易得到，而且價格低廉，但玻璃柱子致命的弱點是它能承受的壓力很小，且非常容易破碎。當由于壓力太小而導致流動相流速很慢的時候，高位液面或加高壓空氣（或者氮氣）的采用是一個簡單的解決辦法。在底下加真空，也能在一定程度上解決這個問題。

不銹鋼柱子具有良好的耐腐蝕、抗壓力性能，但其價格相對很貴。如果，只有很小的分離任務且經費也允許，選擇市面上直徑為1cm的小型制備柱。有機玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕，相對不銹鋼柱子而言，它是半透明的，可以看到液體的運行狀態，對有色的物質其特點就更為突出。

 
04
固定相的選擇：
 

硅膠、鍵合固定相（如C18）、離子交換樹脂 、聚酰胺、 氧化鋁、 凝膠等都可以作為色譜柱的填料。有不少文獻報道，對填料可以進行一下處理提高了分離效果，如，對硅膠進行的硝酸銀（或緩沖液）處理。

 

05
裝柱方法的選擇：
 
根據固定相顆粒度和柱子的尺寸，采用不同的裝柱方法，往往裝填越好分離效果越好。裝柱效果跟填料的顆粒度關系很大，顆粒度的減少會導致裝柱的難度。一般來說，顆粒直徑小于20－30um的固定相采用濕法裝填。所謂“敲擊－裝填”技術適用于顆粒直徑大于25um的固定相。濕法的目的是迫使相對稀松的 固定相懸漿以高速裝入色譜柱子，從而減少空隙的形成。然而，當柱直徑大于20mm，所加壓力為30－40bar時，高壓懸漿裝填技術就變得十分復雜。為將小顆粒固定相裝入更大的制備型色譜柱，可采用柱長壓縮技術。這種方法，先將固定相懸漿（或偶爾是干填充物）裝入柱中加壓，利用物理方法將其壓緊。壓緊的方法有兩種：徑向壓縮和軸向壓縮。濕法裝柱需要一定的設備，在柱子填完后，應用有柱效的測量，對柱效低的柱子應該重填。
 
06
流動相的選擇：
 

除了和分析色譜同樣的考慮外，在選用流動相時，要考慮色譜分離后面加有旋轉蒸發等二次分離操作。一般來說，不宜采用高毒性溶劑，對多元溶劑要盡可能的少用。

如果產品中含有大量溶劑，溶劑的純度也要考慮在其中。

 

07
加樣的方法：
 

可以采用以下方法之一進樣。－用注射器進樣－用旋轉閥進樣－通過六通閥進樣－通過主泵進樣－通過輔泵進樣－固體上樣

 

08
泵的選用：
 

生產制備色譜泵的廠商很多。根據有無脈沖、能承受的大壓力、控制的精度、售后服務等來選擇泵。

 

09
檢測器的選用：
 

一般的分析池的大允許流速僅為5 mL/min 或者10mL/min。而專門的制備池的大允許流速可為150mL/min。有時，采用旁路分離管，將少量流體導入分析池進行檢測，是一個不錯的辦法，但其濃度的誤差會相對較大。

 

10
組分保留時間的估計：
 

用分析柱子在同等色譜條件下（同樣的固定相和流動相）測定保留時間后，按照單一組分的線流速（不是體積流速）一定，通過計算可以知道組分的大致保留時間區域。分析譜圖的峰形狀，對確定保留時間也有很大的參考價值。

 

11
產品的收集：
 

手工餾分收集費時費力，自動餾分收集器有很大的方便。許多實驗室和工廠都采用了餾分收集器。

 

12
超載、邊緣切割、中心切割、放大技術與非線性效用
 

在制備色譜中，因為沒有必要達到分析色譜那樣的分離度，可以在一定范圍內大大加大進樣的濃度和體積。在做分離的時候，也有一些分析色譜的時候，不能用到的技巧。因為篇幅關系，不在這里敘述。

 

13
柱轉換技術
 

通過接頭或者閥門，實現柱子的簡單延長，或者比較方便地實現對其中一個（或幾個）組分的精制。

 

14
比較新的制備色譜技術
 

模擬移動床可以連續進樣，并可以利用邊緣切割效用，而且采用了柱切換技術，能更好的利用溶劑和填料，已經應用于工業化生產。其理論和技術也日益完善。

迎頭色譜、超臨界流體色譜、逆流色譜環形色譜、氣相制備色譜等在科研和工業生產中也得到了應用。

 

相關產品

快速中低壓制備色譜儀系列

 
 
 

 

CombiFlash® NextGEN系列快色液相制備色譜儀可從制備純化過程中進行自動識別色譜尺寸和類型，提高制備實驗效率，無論是在提純合成化合物、天然產品、肽或聚合物。直觀的PeakTrak軟件可在數秒內開始分離。根據要純化的樣品的類型和數量選擇正相或反相柱，允許RFID標簽載入運行參數，確認檢測器設置(UV, Vis, ELS和MS)，按下開始，載入樣品，即可開始自動工作，無需人員值守。實驗進行時隨時更改參數？當分離實驗開始時，依然可以修改參數，包括溶劑百分比、波長、流速和運行時間等，不需要進行重復分離。

  • 流量300ml和壓力300psi

  • 允許運行750 g或高達1-2kg的色譜柱

  • 以較高的壓力極限純化低溶解度的樣品

  • 12"或15"智能觸摸屏

  • 更寬動態范圍的檢測器

  • 改進的基線校正支持使用吸收性溶劑

  • 通過簡化的用戶界面更快地處理

  • 節省空間：頂部托盤可容納四個4L的瓶子

  • 改進的梯度曲線可減少多達50%的溶劑

 

EZ Prep 中壓/高壓制備色譜一體機

 
 
 
 

EZ-1.jpg

EZ Prep制備系統是一種雙重功能的純化設備，提供了 FLASH 閃式和 Prep HPLC 兩種色譜模式無縫切換，靈活和性能的不妥協，應對多樣化類型樣品分離。閃式色譜，中低壓預分離后，對于要進一步提高純度，從高壓分離得到更高分離率和純度化合物，是非常理想的選擇，滿足高純度要求。高壓運行HPLC大范圍高效液相色譜柱，高壓高流速減少運行時間。

中壓制備液相FLASH和HPLC高壓制備液相二合一

緊湊空間設計, 自動從正相到反相溶劑的智能切換

  • FLASH中壓預純化4mg-100g

  • HPLC高壓精純化mg-g級，純度達99%

  • HPLC色譜柱大直徑50mm，填料粒徑在5um以下

  • 二元梯度流速達200 mL/min，大耐壓: 3500 psi

  • UV, UV/VIS, ELSD和MS等多種檢測器可選

 

ACCQ Prep HP150 高壓制備型HPLC色譜系統

 
 
 

 

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HP150直觀、易于使用、簡單純化設計理念，用戶界面友好，消除了普通高效液相色譜系統中不必要的和復雜的參數設置。提高高效液相制備色譜性能和準確性，提高純化樣品回收率。內置餾分收集器和集成觸摸屏，緊湊設計節省空間，HP150系統技術特點：

  • 流速1-150 mL/min開發分析方法和制備方法

  • 操作壓力可達6000 psi

  • UV或UV/VIS基礎上選擇ELSD和MS檢測器

  • 一鍵生成聚焦優化梯度

  • 純化時間小化，良好樣本回收率

 

TORRENT 大型純化制備色譜儀

 
 
 

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無人值守大規模自動分離純化，自診斷系統確保足夠溶劑進行純化和廢液溢出；適合各種溶劑器皿和廢液排放，智能液位技術監測溶劑供應和廢液。1 L/min流速、100 psi壓力、300g純化、多功能定制系統，滿足各種樣品、溶劑、餾分和廢物處理設置。大流量泵在1L/min流速即使梯度很小的情況下，可提供準確可靠的、重復性高的二元梯度。

  • 性能：1000ml/min 的流速，可快速的分離高達600g的樣品。

  • 安全：安全性超過了法規的要求，標準配備了流動相系統的壓力傳感器和儀器周邊環境溶劑蒸汽傳感器，確保儀器在正常情況下運行，一旦出現異常及時給出報警并停機。

  • 多功能性：用戶可使用或修改默認的參數，開發自定義的分離程序，同時所有實驗參數均可在運行過程中加以更改，可實時控制實驗過程（包括點擊并拖動修改梯度）。

  • 操作簡便：使用Peaklrak軟件，可以非常直觀地在屏幕中了解參數。

  • 應用范圍：可用于工藝放大、化學研發、生產制造等生產實驗。

  • 廣泛應用于制藥、藥物化學、天然物質、農用化學、化妝品、香精香料等行業

 


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