目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標檢測試劑盒>> BC0180半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50管/48樣 |
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貨號 | BC0180 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,石油 |
主要用途 | 半胱氨酸(Cys)含量檢測 |
半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
一、半胱氨酸提取 : 1、 液體樣品中半胱氨酸提取:取 0.1mL 液體樣品,加試劑一 0.9mL,充分混勻,11000 rpm 4℃離心 10min,取上清液,待測。 2、 組織中半胱氨酸提取:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進行冰浴勻漿,11000 rpm 4℃離心 10 min,取上清液待測。 3、 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(10 4個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);11000rpm,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。二、測定操作: 1. 分光光度計預熱 30 min 以上,調節波長到 600 nm,蒸餾水調零。 2. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 蒸餾水,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測定吸光值,記為 A 空白管。 3. 標準管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 標準液,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測定吸光值,記為 A 標準管。 4. 測定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 100 μL 上清液,500μL 試劑二,500μL 試劑三,混勻后室溫靜置 15 min,于 600nm 處測定吸光值,記為 A 測定管。
半胱氨酸含量計算: 1. 按液體樣品的體積計算:半胱氨酸含量(μmol/mL)=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×(V 樣總÷V 樣)=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) 2. 按樣本質量計算:半胱氨酸含量(μmol/g)=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]×(V 樣總÷V 樣)÷W=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷W 3. 按照蛋白濃度計算:半胱氨酸含量(μmol /mg prot)= [C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)]÷(V 樣×Cpr)=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷Cpr 4. 按細胞數量計算:氨基酸含量(μmol /10 4 cell)=[C 標準品×V 標準品×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管)] ×(V 樣總 ÷V 樣×細胞數量)=1×(A 測定管-A 空白管)÷(A 標準管-A 空白管) ÷細胞數量 C 標準品:標準品濃度,1μmol/mL;V 標準品:反應體系中加入標準品體積,0.1 mL;V 樣:反應體系中加入樣品提取液體積,0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL。W:樣品質量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL。
半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。試劑二:液體×1 瓶,4℃保存。試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存。用前 1 天,向試劑三中加 5 mL 蒸餾水充分溶解,再加磷酸 1.25mL,混勻后蓋緊(防止水分散失)沸水浴 2h;冷卻后加 20 mL 蒸餾水,4℃可保存 2 周。標準品:液體×1 瓶,1μmol/mL 標準液,4℃保存。
相關文獻:
《Sulfur dioxide derivatives alleviate cadmium toxicity by enhancing antioxidant defence and reducing Cd2+ uptake and translocation in foxtail millet seedlings》 作者:Yansha Han,Mengyang Wu,Lihong Hao,Huilan Yi 期刊:Ecotoxicology and Environmental Safety 影響因子:4.527 PMID:29625394