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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 200ml |
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貨號 | P8610 |
人外周血淋巴細胞分離液
外周血中單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞等細胞,其體積、形態(tài)和密度與其他細胞不同,紅細胞和粒細胞密度較大,為1.090 g/ml 左右,而淋巴細胞和單核細胞密度為1.075~1.090 g/ml,血小板為1.030~1.035 g/ml。為此,將葡聚糖(右旋糖酐)和泛影酸葡甲胺按一定比例混合,調(diào)整比重、pH 值和滲透壓,經(jīng)過澄清及過濾除菌后制成一種密度在1.077g/ml 并且近于等滲的溶液(分層液),經(jīng)過密度梯度離心使一定密度的細胞按相應(yīng)密度梯度分布,從而將各種血細胞加以分離。
人外周血淋巴細胞分離液
本品為帶有乳光或微乳光的注射水溶液,主要組成成份是葡聚糖(右旋糖酐)與泛影酸葡甲胺。適用于從人抗凝血液中分離單個核細胞(主要為淋巴細胞),無菌條件下所分離的細胞可用于免疫學(xué)檢測。
分離方法說明及圖例:
取新鮮抗凝血1ml,與生理鹽水1:1 混勻后,小心加于2ml細胞分離液之液面上;以400g(約1500轉(zhuǎn)/分,半徑15cm水平轉(zhuǎn)子)離心20分鐘,此時離心管中由上下細胞分四層。*層:為血漿層。第二層:為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層:為透明分離液層。第四層:為紅細胞層。收集第二層細胞放入含生理鹽水4-5ml的試管中,充分混勻后,以400g(約1500轉(zhuǎn)/分)離心20分鐘。沉淀經(jīng)2次洗滌后即得所需淋巴細胞。
注: 提取率約為80%。
注意事項:
A.本分離液要求血液為新鮮抗凝血,避免冷凍和冷藏;在收集血液和分離過程中,應(yīng)注意無菌操作,避免微生物污染。
B.本實驗要求,在正常大氣壓下,分離液、分離樣本以及分離環(huán)境溫度為20℃±2℃。分離液在低溫時呈較高密度,在高溫時呈較低密度。細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,操作前可將樣本和分離液置于20℃水浴中復(fù)溫20分鐘以保證分離溫度。
C.由于各品牌離心機的性能不同,國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時間,摸索佳的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。
D.好使用無靜電反應(yīng)的離心管,推薦使用未經(jīng)過堿處理的玻璃離心管。
E.優(yōu)抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。應(yīng)注意在血液稀釋過程中應(yīng)去除抗凝劑體積。
產(chǎn)品性能指標(biāo):
密度 1.077±0.001g/ml
pH 7.0-7.5
滲透壓 280-340mOsmol/kg
內(nèi)毒素 ≤0.5EU/ml
無菌 直接接種培養(yǎng)14天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下
貯藏及保存期限:
本分離液是敏光型的,應(yīng)在18℃-25℃避光保存,有效期兩年。啟封后置4℃保存,若保證無微生物污染, 4℃可長期保存。保存溫度較低(10℃以下)時本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
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