目錄:北京索萊寶科技有限公司>>多肽及蛋白質(zhì)>>蛋白質(zhì)定量>> PC0020BCA蛋白濃度測定試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500微孔(50T) |
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貨號 | PC0020 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+, Cu+與BCA試劑形成紫藍(lán)色的絡(luò)合物, |
BCA蛋白濃度測定試劑盒
注意事項(xiàng):
1. 長期不用時(shí),Cu試劑與PBS稀釋液可置于2-8℃保存,如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染則應(yīng)丟棄。BCA試劑在低溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時(shí),可37℃溫育使其*溶解, 不影響使用。
2. 樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時(shí),請采用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
BCA蛋白濃度測定試劑盒
操作說明:
一. 微孔酶標(biāo)儀法
1. 配制工作液:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁,但混勻后就會(huì)消失)。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:取10μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋100μL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品孔中,加PBS補(bǔ)足20μL。
3. 將樣品作適當(dāng)稀釋(多做幾個(gè)梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20μL到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量樣品時(shí)誤差偏大,標(biāo)準(zhǔn)線前面的點(diǎn)可能不很準(zhǔn)確,所以盡可能的讓樣品點(diǎn)落在標(biāo)準(zhǔn)線1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液,37℃放置15-30分鐘。用酶標(biāo)儀測定A562nm,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時(shí),應(yīng)注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。
二. 分光光度計(jì)法 如沒有酶標(biāo)儀,可用分光光度計(jì)在離心管中混勻后加入比色皿中比色。 步驟如下:
1. 配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑(50:1)配制成BCA工作液,充分混勻(混合時(shí)可能會(huì)有渾濁,但混勻后就會(huì)消失)。BCA工作液室溫24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。
2. 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:取100μL BSA標(biāo)準(zhǔn)品用PBS稀釋1mL(樣品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/mL。
3. 取八支(或者更多)5mL離心管,標(biāo)上號,按下表加入試劑。
4.37℃放置15-30分鐘。用分光光度計(jì)測562nm處吸光值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。
參考文獻(xiàn):
《Effect of 1α, 25-dihydroxyvitamin D3 on the osteogenic differentiation of human periodontal ligament stem cells and the underlying regulatory mechanism》 作者:Yawen Ji,Panpan Zhang,Yixiao Xing,Linglu Jia,Yunpeng Zhang,Tingting Jia,Xuan Wu,Bin Zhao,Xin Xu 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365053
《Rhein enhances the cytotoxicity of effector lymphocytes in colon cancer under hypoxic conditions》 作者:Xiangfei Yuan,Wencong Tian,Yang Hua,Lijuan Hu,Jing Yang,Junmuzi Xie,Jiacai Hu,Feng Wang 期刊:Experimental and Therapeutic Medicine 影響因子:1.448 PMID:30542494
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