目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化指標(biāo)檢測試劑盒>>生化試劑盒>> BC0085硝酸還原酶(NR)活性檢測試劑盒
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更新時(shí)間:2024-08-23 17:51:49瀏覽次數(shù):1407評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 |
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貨號(hào) | BC0085 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 測定意義:NR( EC 1.7.1.3)廣泛存在于植物中,是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài) |
硝酸還原酶(NR)活性檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:580
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 硝酸還原酶檢測試劑盒|NR檢測試劑盒|硝酸還原酶|試劑盒
簡要介紹:
NR廣泛存在于植物中,是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶,也是誘導(dǎo)酶,對(duì)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。
NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ+NADH+H+→NO2ˉ+NAD++H2O ;產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,與對(duì)氨基ben磺酸及α-萘胺定量生成紅色偶氮化合物;生成的紅色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰,可用分光光度法測定。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,-20℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加入2mL提取液溶解,可分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
試劑三:液體2mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水溶解,可分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
試劑五:液體8mL×1瓶,4℃保存。(如出現(xiàn)結(jié)晶析出,60 ℃水浴溶解后使用)
試劑六:液體8mL×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:NaNO2標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1mL,10μmol/mL,-20℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋0.2μmol/mL。
誘導(dǎo)劑應(yīng)用液的配制:用時(shí)將誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液用水稀釋10倍,即取10mL誘導(dǎo)劑儲(chǔ)備液加90mL蒸餾水,充分混勻。
產(chǎn)品說明:
NR( EC 1.7.1.3)廣泛存在于植物中,是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶,也是誘導(dǎo)酶,對(duì)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。
NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ+NADH+H+→ NO2ˉ +NAD++H2O;產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,與對(duì)–氨基ben磺酸α-萘胺定量生成紅色偶氮化合物;生成的紅色偶氮化合物在540 nm有大吸收峰,可用分光光度法測定。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品測定的前處理
1、取適量誘導(dǎo)劑于燒杯中,將新鮮標(biāo)本洗凈,濾紙吸干,放入誘導(dǎo)劑應(yīng)用液中(淹沒即可),浸泡2h,取出樣本,濾紙吸干后,-20℃冷凍30min,取出樣本,濾紙吸干。(根據(jù)需要進(jìn)行誘導(dǎo)處理)
2、稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液,冰浴研磨,4000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。
二、測定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長540nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定(在EP管中加入下列試劑)
試劑名稱(μL) | 加樣孔 | |||
測定管 | 對(duì)照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |
樣本 | 50 | 50 | - | - |
標(biāo)準(zhǔn)溶液 | - | - | 50 | - |
雙蒸水 | - | - | - | 50 |
試劑一 | 180 | 180 | 180 | 180 |
試劑二 | 20 | - | 20 | 20 |
混勻后,37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴30min | ||||
試劑三 | 20 | 20 | 20 | 20 |
試劑二 | - | 20 | - | - |
4000g 常溫離心10min,取上清液。 | ||||
上清液 | 80 | 80 | 80 | 80 |
試劑四 | 20 | 20 | 20 | 20 |
試劑五 | 50 | 50 | 50 | 50 |
試劑六 | 50 | 50 | 50 | 50 |
混勻,顯色20min,520nm下比色,分別記為A測定、A對(duì)照、A標(biāo)準(zhǔn)、A空白。計(jì)算ΔA=A測定-A對(duì)照,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白
注意:空白管只需測一次。
三、NR活性計(jì)算:
(1)按樣本鮮重計(jì)算:
單位定義:每小時(shí)每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol NO2ˉ的量為一個(gè) NR活力單位。
NR(U/g 鮮重)=ΔA÷(ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V提取÷W÷T =0.4×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W。
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位定義:每小時(shí)每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol NO2ˉ的量為一個(gè) NR活力單位。
NR(U/mg prot)==ΔA÷(ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V樣品÷(V樣品×Cpr)÷T=0.4×ΔA÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr。
V樣品:吸取樣本體積,0.05mL;V提取:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,0.5h;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)液濃度,0.2μmol/mL。
注意事項(xiàng):
1、當(dāng)測定的吸光值大于1.2或者ΔA大于0.8時(shí),建議將上清液稀釋后測定。
2、ΔA測定過?。ㄐ∮?.01),可延長反應(yīng)時(shí)間(水浴時(shí)間)。
相關(guān)文獻(xiàn):
《FIP1 Plays an Important Role in Nitrate Signaling and Regulates CIPK8 and CIPK23 Expression in Arabidopsis》 作者:Chao Wang, Wenjing Zhang, Zehui Li, Zhen Li, Yingjun Bi, Nigel M. Crawford and Yong Wang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.716 PMID:
《Knockout of SlSBPASE Suppresses Carbon Assimilation and Alters Nitrogen Metabolism in Tomato Plants》 作者:Fei Ding, Qiannan Hu, Meiling Wang and Shuoxin Zhang 期刊:International Journal of Molecular Sciences 影響因子:4.183 PMID:30558146
《The trehalose-6-phosphate synthase TPS5 negatively regulates ABA signaling in Arabidopsis thaliana》 作者:Lianfu Tian,Zijing Xie,Changqing Lu,Xiaohua Hao,Sha Wu,Yuan Huang,Dongping Li,Liangbi Chen 期刊:Plant Cell Rep. 影響因子:3.499 PMID:30963238
硝酸還原酶(NR)活性檢測試劑盒
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