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CAS | 詳詢客服 | 純度 | 詳詢客服 |
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分子量 | 詳詢客服 | 分子式 | 詳詢客服 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 20T |
貨號 | D1250 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農業,綜合 |
主要用途 | 回收DNA片段,同時除去蛋白質、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質 |
聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒
貨號:D1250
規格:5T、20T、50T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復檢期 12 個月,2℃-8℃保存時間更長。
產品說明:
本試劑盒采用可以高效、專一結合 DNA 的硅基質材料的緩沖液系統,從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA 片段,同時除去蛋白質、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質。使用本試劑盒回收的DNA 可適用于后續各種常規操作,包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉化等實驗。
產品包裝:
操作步驟:
*次使用前請先在15ml漂洗液中加入60ml無水乙醇, 所有離心步驟均可使用臺式離心機在室溫下離心。
1.將單一的目的 DNA 條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下 (盡量切除多余部分) , 放入 1.5ml 離心管中, 稱取重量,用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入 2 倍體積的溶液 A 吹打混勻(每 100mg 膠加入 200ul 溶液 A) ,75℃水浴30 分鐘。
2.用 1ml 的去尖吸頭吸取混合物過濾柱中(將膠一起吸入,溶液過多時可分次加入) 。13,000rpm 離心1分鐘。將收集管中的濾出液轉入新離心管中。
3. 取六倍體積溶液 B 加入原離心管中(每 100mg 膠加入 600ul) ,清洗管壁后加入過濾柱中(溶液過多時可分次加入),顛倒過濾柱或輕輕吹打幾次混勻,13,000rpm 離心 1 分鐘。將所有收集的濾出液混合。
4.將總濾出液混勻后加入吸附柱中(溶液過多時可分次加入) ,13,000rpm 離心 30-60 秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放入收集管中。
5.向吸附柱中加入 600μl 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇) ,13,000rpm 離心 30-60 秒,倒掉廢液,將吸附柱重新放入收集管中。
6.向吸附柱中加入 600μl 漂洗液,13,000rpm 離心 30-60 秒,倒掉廢液。
7.將離心吸附柱放回收集管中,13,000rpm 離心 2 分鐘,盡量除去漂洗液。將吸附柱開蓋置于室溫 1-2 分鐘,*晾干,以防止殘留的漂洗液影響下一步的實驗。
8.將吸附柱放到一個干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量 65–70℃預熱的洗脫緩沖液 20-30μl,室溫放置 2 分鐘。13,000rpm 離心 2 分鐘收集 DNA 溶液。注意:①為了增加回收效率,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中13,000rpm 再次離心 1 分鐘。②洗脫緩沖液體積不應少于 20μl,體積過小影響回收效率。③洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有很影響。若用水做洗脫液應保證其 pH 值在 7.0-8.5 之間。
9.DNA 回收產物直接后續實驗或者-20℃保存。
注意事項:
1、電泳時好使用新的電泳緩沖液, 以免影響電泳和回收效果,如下一步實驗要求較高,則應盡量使用TAE電泳緩沖液。
2、切膠時,紫外照射時間應盡量短,以免對DNA造成損傷。
3、回收<100bp及>10kb的DNA片段時, 應加大溶膠液的體積,延長吸附和洗脫的時間。
4、回收率與初始DNA量和洗脫體積有關,初始量越少、洗 脫體積越小,回收率越低。
5 、如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。
2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。
3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5、請辦理完貨款后,將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以短信、等形式通知我們。
運輸說明:
1、極低溫產品:極低溫產輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。