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人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1/CCL11試劑盒

參   考   價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號:

品       牌:其他品牌

廠商性質:代理商

所  在  地:上海市

更新時間:2024-02-21 14:29:11瀏覽次數:404

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供貨周期 一個月 應用領域 化工,生物產業
人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1/CCL11試劑盒專業經營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養基、一抗、二抗、其產品吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA實驗等。

人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1/CCL11試劑盒

人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1/CCL11試劑盒必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。

培養基 :"*培養基有售,用我們拜力生物的*培養基,細胞培養更省心!"

供應商 :拜力生物

貨期 :7-10天

1.  試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。

2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

4.   洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。

5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

6.  反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。

7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。

建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。

如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。

要產品包括限制性內切酶,聚合酶,修飾酶,各種載體, Marker , 引物,測序,基因突變系統,噬菌體呈現,蛋白質工具(蛋白激酶,磷酸酶,糖生物學,蛋白酶)。該公司產品線主要分為以下九大方面:①限制性內切酶;②聚合酶與擴增技術;③DNA修飾酶與克隆技術;④核酸;⑤RNAi與RNA酶;⑥基因表達和蛋白純化技術;⑦感受態細胞;⑧蛋白質工具;⑨表觀遺傳學。

◇      液體類標本

標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。

◇      血清:

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

◇      血漿:

應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

◇      尿液、胸腹水、腦脊液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成,應再次離心。

◇      細胞培養上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

收到后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。

注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
標準蛋白表達服務
1. 克隆目標蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉移載體上;
2. 制備重組bacmid DNA;
3. bacmid DNA轉染昆蟲細胞,制備P1和P2病毒stock;
4. P2病毒滴度測定
5. 重組蛋白表達評估和條件優化;
6. 小規模蛋白表達和純化(500 ml培養物);
7. 大規模蛋白表達和純化(可選)。
病毒制備服務
1. 克隆目標蛋白編碼序列到合適的桿狀病毒轉移載體上;
2. 制備重組bacmid DNA;
3. bacmid DNA轉染昆蟲細胞,制備P1和P2病毒stock;
4. P2病毒滴度測定(滴度108-109);
5. 蛋白表達驗證;
6. P3病毒制備(可制備3L重組桿狀病毒)。

儀器(Instruments)、細胞融合、轉染、培養(Cell Fusion, Transfection, Culture)、體外翻譯(In vitro Translation)、抗體(Antibodies)、檢測試劑盒(ELISA & Detection Kits ELISA)、生物醫學相關(Biomedical)、蛋白質、多肽&糖類(Proteins, Peptides & Sugars)、化學試劑(Chemicals)、分子生物(DNA Molecular Biology)

現在一般完整的試劑盒應該有一下幾個組成:

(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);

(3)酶的底物;

(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);

(5)結合物及標本的稀釋液;

(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。


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