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小RNA克隆試劑盒產品及特點
克隆是分析低分子RNA的有效方法之一。由于低分子RNA不具有PolyA tail,
需在低分子RNA的5’端和3’端分別加上RNA接頭或者RNA/DNA雜合形式的接
頭,經RT-PCR后便可以進行克隆。小RNA克隆試劑盒是根據以上原理開發的,其
流程圖如下:
對低分子RNA進行cDNA擴增的試劑盒,經本試劑盒擴增的cDNA可以用于各種
載體的克隆。擴增得到的cDNA可以直接用于TA克隆,或者利用接頭中帶有的酶切
位點進行克隆。
備注
使用本試劑盒對小RNA進行克隆時的操作流程見圖,詳細步驟如下:
1. 將小RNA進行BAP處理,5’端去磷酸化。
2. BAP處理后的小RNA的3’端與生物素化的RNA/DNA接頭連接。
3. 用標記Strepto avidin的磁珠,回收帶有生物素的RNA/DNA接頭的Small
RNA,然后進行5’端磷酸化反應。
4. 將5’端連接上RNA/DNA嵌合的接頭后,使用RT Primer和M-MLV反轉錄酶
進行反轉錄反應。
5. 從磁珠上回收合成的cDNA后,進行PCR反應。
6. PCR片段經限制酶酶切后,回收、克隆。120101-2 谷胱甘肽瓊脂糖 2mL 490 7-29
120201-25 超敏化學發光 (HRP) 檢測試劑盒(ECL) 25mL 190 7-106
120201-250 超敏化學發光 (HRP) 檢測試劑盒(ECL) 250mL 1090 7-106
120202-100 血液保存和 DNA 純化套裝 100 次 990 2-24
120307-1000 SP6 RNA 聚合酶 1000U 207 10-33
120307-5000 SP6 RNA 聚合酶 5000U 997 10-33
120308-15 植物葉綠體純化試劑盒 15 次 890 8-22
120309-1000 T3 RNA 聚合酶 1000U 150 10-35
120309-10000 T3 RNA 聚合酶 10000U 1290 10-35
120310-1000 T7 RNA 聚合酶 1000U 128 10-34
120310-25000 T7 RNA 聚合酶 25000U 2298 10-34
120312-2500 末端脫氧核苷轉移酶 (TdT) 2500U 1598 10-29
120312-500 末端脫氧核苷轉移酶 (TdT) 500U 398 10-29
120401-100 熱啟動 Taq DNA 聚合酶 100U 157 10-3
120402-1 PCR LIC 克隆套裝 1μg 990 6-17
120403-300 蝦堿性磷酸酶 300U 597 10-54
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