詳細介紹
重組羧肽酶B(RCPB)
◆概述
羧肽酶B(E.C 3.4.17.2)屬金屬羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,可選擇性水解蛋白或多肽羧基端的Arg和Lys。不同于切割芳香族或脂肪類氨基酸殘基的羧肽酶A,羧肽酶B優先切割堿性氨基酸※,同時也能切割一些非堿性氨基酸。重組CPB的活性受到典型的金屬螯合劑如EDTA,及Cu2+,Hg2+抑制;而Zn2+,Mn2+等金屬離子則能夠不同程度提高酶活。CPB的適pH為8.0,偏酸或偏堿均會造成活性下降,pH接近5.0時活性接近零,pH>12.0時活性*喪失。CPB在一定溫度內(<60 ℃)活性隨溫度升高而上升。
※堿性氨基酸:水解生成的氫氧根負離子多于氫正離子的氨基酸,其特點是側鏈常含有可質子化的堿性化學基團。包括以下三種:
中文名 | 英文名 | 縮寫 | 符號 | 等電點 |
精氨酸 | Arginine | Arg | R | 10.76 |
賴氨酸 | Lysine | Lys | K | 9.74 |
組氨酸 | Histidine | His | H | 7.59 |
◆優勢
● 單批次產量大,批間差小
● 高純度,高比活性
● 無外源性病毒污染,無動物源生產原料
◆應用范圍
生產工藝:重組胰島素及其類似物的生產制備工藝,重組多肽類藥物的生產制備工藝等。
質控與科研:單克隆抗體的質量檢測,蛋白質C-末端氨基酸測定等。
◆純度
SDS-PAGE顯示純度>90%。
◆使用方法
保存:25 mmol/L Tris-HCl, pH 7.6或無菌水;溶解后分裝-15 ℃以下保存。
酶切體系:pH 7.5~9.0;
推薦使用量:蛋白酶:融合蛋白質量比1:50~1:1000
◆保存條件
儲存穩定性:凍干粉存于-15 ℃以下,24個月穩定;25 mmol/L Tris-HCl,pH 7.6溶解后分裝儲存于-15 ℃以下,
儲存穩定性:反復凍融5次,活性無損失;溶解后2~8 ℃保存建議不超過3 d。
運輸穩定性:冰袋保溫運輸,活性穩定。
◆應用實例
RCPB特異性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理論酶切位點酶切產物YGKRLW及K,蛋白酶:合成多肽質量比1:5000,37 ℃酶切反應10 min,LC-MS驗證酶切反應特異性。
Peak# | R.T. | M.W. | Sequence |
Peak 1 | 7.06 min | 950.15 | YGKRLWK |
Peak 2 | 8.27 min | 821.98 | YGKRLW |
◆產品信息
產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 比活 |
RCPB0302 | RCPB | 10 mg | 150 U/mg |
RCPB0304 | RCPB | 10 μg | 150 U/mg |
◆相關產品
產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 儲存條件 | 其他信息 |
MDRK0301 | 重組羧肽酶B檢測試劑盒 | 96 孔 | 2~8 ℃ | 檢測范圍: |