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參考價:¥1500 ~ ¥3800
更新時間:2024-12-05 15:35:23瀏覽次數:255評價
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1×106cells |
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貨號 | E-XB6643 | 應用領域 | 生物產業 |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 組織來源 | 骨髓,基質 |
種屬來源 | 小鼠 |
傳代培養操作步驟:
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養瓶底。
(4)把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。
(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養瓶中,補足培養液,搖勻,放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
(8)根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。
OP9小鼠骨髓基質細胞
細胞基本屬性:
產品名稱 | OP9小鼠骨髓基質細胞 | 年齡性別 | 胚胎 |
種屬 | 小鼠 | 組織來源 | 骨髓,基質 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 |
細胞詳細介紹:
細胞別稱 OP-9;OP9 ;小鼠骨髓基質細胞 背景介紹;OP9細胞株源自新生的op/op 小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個突變,它不能生成有功能的巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細胞(ES)分化成血細胞而不是其他巨噬細胞有抑制功能。OP9細胞可以用于與小鼠胚胎干細胞共培養以誘導胚胎干細胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細胞譜系的血細胞。與OP9共培養不需要外源的生長因子或復雜的胚胎結構。這個系統對研究造血細胞的發育和分化的分子機理有用。 生物安全等級;1 倍增時間;~26小時 細胞規格;1×106cells/T25或1mL凍存管 支原體檢測;無 保藏機構;ATCC; CRL-2749 培養基;MEM-a+20% FBS+PS 培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無血清凍存液,液氮儲 發貨方式復蘇發貨(免運輸費用)/ 凍存發貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下:
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%(細胞懸液變黃)時,即可進行傳代。
(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發生污染。
(2)所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。
(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數量和實驗進度。
(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。
(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。
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