目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細胞>>大鼠原代細胞>> 大鼠乳腺成纖維細胞
參考價 | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價:¥2600 ~ ¥6000
更新時間:2024-12-06 14:31:32瀏覽次數(shù):181評價
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
---|---|---|---|
貨號 | EY-XY3468 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 組織來源 | 乳腺 |
種屬來源 | 大鼠 |
原代細胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞、組織或器官,讓它們在體外維持與生長。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性, 因此用于藥物實驗,尤其是藥物對細胞活動、結(jié)構(gòu)、代謝、有無毒性或殺傷作用等,是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng),因為方法簡單,細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,取待培養(yǎng)的組織適量,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉組織塊表面的血污。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標(biāo)記, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱, 如無特殊情況,不必觀察。1~2 周后,可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。
(9) 一般說來,若培養(yǎng)液無明顯改變, 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,即可進行傳代培養(yǎng)。
大鼠乳腺成纖維細胞
細胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠乳腺成纖維細胞 | 組織來源 | 乳腺 |
種屬 | 大鼠 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 成纖維細胞樣 | 英文名稱 | Rat Mammary Fibroblasts Cells |
貨號 | EY-XY3468 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠乳腺成纖維細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
大鼠乳腺成纖維細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來。大鼠乳腺成纖維細胞分離自乳腺組織;乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間,形成許多間隔,這些纖維結(jié)締組織對乳房起固定作用,而纖維結(jié)締組織是由成纖維細胞構(gòu)成的。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分, |
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管緊張素II受體樣蛋白1抗體
組織樣品組織B(CATHEPSIN B)活性熒光定量檢測試劑盒
組蛋白H2A-T129磷酸化檢測試劑盒
pcDNA3.1+目的基因
MAPK蛋白免疫共沉淀分析試劑盒
藻類含量比色法定量檢測試劑盒
組織糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法
酵母鎂離子濃度酶反應(yīng)光譜法定量檢測試劑盒
纖維蛋白溶酶(PLASMIN)活性比色法定量檢測試劑盒
血液甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSH ST)總活性比色法定量檢測試劑盒
質(zhì)粒/蛋白制備樣品內(nèi)毒素凝膠法定量檢測試劑盒
細胞CASPASE-1蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
植物總比色法定量檢測試劑盒
組蛋白H4-K8乙?;瘷z測試劑盒
組織PLK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
Phalloidin-FITC標(biāo)記法細胞凋亡檢測試劑盒
中心體蛋白152抗體
谷脫羧酶樣蛋白1抗體
溶質(zhì)載體家族16成員8抗體
MBLAC2蛋白抗體
細胞周期蛋白依賴性激酶CABLES2抗體
巴豆酰組蛋白H2B重組兔單克隆抗體
磷酸化Bcl-xL(Ser62)抗體
大鼠乳腺成纖維細胞CD20樣蛋白2抗體
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細胞培養(yǎng)實驗)
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數(shù)板1塊;7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;8、酒精燈1臺;
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,重復(fù)步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液,1200r/rain,5分鐘,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細胞直至上清清亮為止。
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)