詳細介紹
蛋白手性柱
α-酸性糖蛋白分子由181個氨基酸殘基和40個唾液酸(sialic acid)殘基構成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性,等電點為2.7。含有兩個二硫鍵,性質(zhì)很穩(wěn)定。α-酸性糖蛋白分子可以共價鍵合到硅膠上,制成手性色譜柱,可以分離許多化合物。
α-酸性糖蛋白手性色譜柱使用的流動相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和很小比例的有機相。有機相*異丙醇,如達不到分離要求,可以嘗試乙腈,乙醇,甲醇或四氫呋喃。有機相的改變導致蛋白結構發(fā)生暫時的改變。色譜柱的負載量至關重要,典型的負載量為0.02mg/ml的濃度樣品,進樣20μl。pH 的改變對手性選擇性起關鍵作用,尤其是胺類化合物。pH降低導致蛋白質(zhì)負電荷的降低,引起胺類化合物保留時間減小,然而這意味著可以減小有機相比例,使選擇性增加,峰形改善。
通過調(diào)節(jié)有機相比例仍無法達到分離效果時,有時需用電荷調(diào)節(jié)劑。但這可能引起蛋白結構的*改變,這些電荷調(diào)節(jié)劑包括丁酸、辛酸、癸酸和二甲基辛胺。有時也用到1,2 亞乙基二醇,1,2丁醇和氯化鈉。溫度對分離也有影響,溫度增加保留時間,減小分離因子。
人血清白蛋白(HSA)分子量為69,000,等電點為4.8。蛋白中認為存在兩個藥物結合位點:華法令-氮雜普魯帕宗(warfarin-azapropazone)和苯基二氮雜-吲哚(benzodiazapine-indole)結合位點。流動相中加入辛酸,采用人血清白蛋白手性色譜柱可以有效分離benzodiazapine。Warfarin 和oxazepam也用人血清白蛋白手性色譜柱得到了分離,流動相組成為:100mM磷酸緩沖液pH7:乙腈:異丙醇 = 84:10:6。
牛血清白蛋白(BSA)為球型蛋白,分子量為66,000,等電點為4.7。此蛋白為一個單氨基酸鏈,通過17個二硫鍵形成9個雙環(huán)。許多化合物通過牛血清白蛋白手性色譜柱得到分離。牛血清白蛋白不如α-酸性糖蛋白穩(wěn)定,一些有機溶劑(如乙腈、甲醇)可使蛋白變性,因此使用起來要特別注意。
卵類粘蛋白由蛋清中提取,分子量為55,000。它可分離大量的胺類和酸類化合物。
蛋白手性色譜柱的載樣量均較小。影響了蛋白手性色譜柱在制備色譜中的應用。
蛋白手性色譜柱在所有手性色譜柱中是應用zui廣的色譜柱,但并不是效果的色譜柱。
蛋白質(zhì)鍵合手性柱描述產(chǎn)品描述 | 規(guī)格 | 貨號 |
Reprosil Chiral-AGP(α1-酸性糖蛋白手性柱), 粒徑5μm,USP L41填料,反相系統(tǒng)
具有zui廣泛的適用范圍: 1:胺類化合物(一級胺,二級胺,三級胺,四級胺類化合物) 2:酸性化合物(強酸性化合物,弱酸性化合物) 3:非質(zhì)子類化合物(酰胺類化合物,酯類化合物,醇類化合物,亞砜類化合物等) 4;例如纈沙坦原料檢測
| 150 x 4mm | r35.agp.s1504 |
100 x 4mm | r35.agp.s1004 | |
150x3mm | r35.agp.s1503 | |
100 x 3mm | r35.agp.s1003 | |
50 x3 mm | r35.agp.s0503 | |
Guards(5 x 3 mm, 2 pieces | r35.agp.v0003 | |
Guard holder(direct ) | PN:81.00 | |
150x2mm | r35.agp.s1502 | |
100 x 2mm | r35.agp.s1002 | |
50 x2 mm | r35.agp.s0502 | |
Guards(5 x 2 mm, 2 pieces) | r35.agp.v0002 | |
Guard holder(direct ) | PN:91.00 | |
Reprosil Chiral-HSA(人體血清白),粒徑5μm,USP L79填料,反相系統(tǒng)
硅膠表面共價鍵合有人體血清白蛋白,適用于反相系統(tǒng)。 適用分離的化合物:強酸、弱酸、兩性離子和非質(zhì)子類化合物 | 150x2mm | r35.hsa.s1502 |
100 x 2mm | r35.hsa.s1002 | |
50 x2 mm | r35.hsa.s0502 | |
Guards(5 x 2 mm, 2 pieces) | r35.hsa.v0002 | |
Guard holder(direct ) | PN:91.00 |