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100次
Megazyme/愛爾蘭
生產(chǎn)商
北京市
更新時(shí)間:2024-11-19 21:58:02瀏覽次數(shù):3015次
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原理(AOAC法 2002.02 ;AACC法32-40)
樣品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振蕩水浴孵育16小時(shí),在這期間,通過兩種酶的聯(lián)合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育結(jié)束后,加入等體積的乙醇或工業(yè)甲基化酒精(IMS,變性乙醇)終止反應(yīng)。離心上述溶液,收集上清勿棄,底部殘留絮狀團(tuán)即為樣品中的RS,用含水的IMS或乙醇(50%v/v)洗滌絮狀團(tuán),洗滌后離心,再重復(fù)一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體,將絮狀團(tuán)置于冰水浴中,加入2M KOH溶解,溶解的同時(shí)用磁力攪拌機(jī)劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將這個(gè)溶液調(diào)至中性,用AMG將淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑(GOPOD)測(cè)定,這也是對(duì)樣品中RS含量的測(cè)定。非抗性/淀粉(可溶性淀粉)的測(cè)定可通過集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD測(cè)定D-葡萄糖完成。
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