正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

商品屬性：

測定意義：

NOX(EC 1.6.99.3)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,可在氧氣存在下,直接將 NADH 氧化為 NAD。該酶不僅參而且與免疫反應密切相關。 

測定原理:

 NOX 能夠將 NADH 氧化為 NAD,NADH 的氧化與 2,6 二氯酚靛藍(DCPIP)的還原相偶聯,藍色的 DCPIP被還原為無色的 DC測定藍色 DCPIP 的還原速率計算出 NADH 氧化酶活性的大小。 

需自備的儀器和用品: 

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、蒸餾水 

試劑的組成和配制：

試劑一:液體 100mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑三:液體 1.5mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑四:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

試劑五:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 5mL 蒸餾水,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。 

組織樣本的前處理：

組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:

① 準確稱取 0.1g 組織或收集 500 萬細胞,加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

② 將勻漿 600g,4℃離心 5min。

③ 棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11100g,4℃離心 10min。

④ 上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的 NOX(此步可選做)。

⑤ 步驟④中的沉淀即為線粒體,加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率 20%或200W,超聲 3s,間隔 10 秒,重復 30 次),用于 NOX 活性測定。

血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟：

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 600nm,蒸餾水調零。

2、 樣本測定

(1)試劑四于 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)孵育 5min。

(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、200μL 試劑四和 40μL 試劑五,混勻,記錄 600nm處 20s 時吸光值 A1 和光值 A2,計算 ΔA=A1-A2。

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 600nm,蒸餾水調零。

2、 樣本測定

(1)試劑四于 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)孵育 5min。

(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、200μL 試劑四和 40μL 試劑五,混勻,記錄 600nm處 20s 時吸光值 A1 和光值 A2,計算 ΔA=A1-A2。

生化檢測試劑盒實驗操作說明：

一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性（GOD）檢測、總抗氧化能力（TAC）檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚（TP）含量檢測試劑盒。

氧化酶（XO）活性分析試劑盒為例，提供了一種簡單易用的比色分析法，用于測定各種樣品中的XO活性，特點是測定血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性，以及廣泛的檢測范圍：15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫（H2O2）檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

蛋白質羰基含量檢測試劑盒（比色法）為例，提供了一種簡單易用的比色法，用于分析不同生物樣品（細胞/組織裂解液，生物液體）中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

特點是：1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。

三、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例，提供一種簡單易用的比色測定法，用于定量測定血清，血漿，組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點是：1.測定血清，血漿，組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性，zui大抑制率可接近100％，不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍：3.13- 200U/mL。

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