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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質生物學>>蛋白提取和裂解>> 皮膚組織蛋白提取試劑盒

皮膚組織蛋白提取試劑盒
  • 皮膚組織蛋白提取試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地
屬性

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更新時間：2024-11-23 17:56:58瀏覽次數：98評價

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產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 皮膚組織蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種動物皮膚組織樣品中提取蛋白。本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳等下游蛋白研究實驗。本試劑盒提取的蛋白為不具有天然蛋白構象的非活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用兼容。本試劑盒提取的蛋白樣本含
保存溫度
2-8℃ 保存
注意事項
蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
有效期
一年
檢測方法
WB等
適用樣本
皮膚組織
產品特點
1.提取過程簡單方便，將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 2.含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。 3.紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。 4.總蛋白提取液含多種有效成分，可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可結合釋出的蛋白防止沉淀。 5.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
WB等
儀器準備
1.離心機 2.振蕩器 3.勻漿機/勻漿器 4.渦旋混勻器 5.移液器 6.冰箱 7.冰盒
試劑準備
PBS緩沖液 蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管 2.吸頭 3.一次性手套
使用注意事項
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。 2.蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。 3.實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。 4.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。 5.如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。 6.可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
使用方法
1.提取液準備： 每500ul冷的蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物B和2ul蛋白酶抑制劑混合物C，混勻后置冰上備用。 2.取100-200mg皮膚組織樣本，用PBS洗干凈，然后用刀盡可能剪碎，加入500ul蛋白提取液，用組織勻漿器/勻漿機勻漿至無明顯肉眼可見固體。 3.將組織勻漿吸入一預冷的干凈離心管中，在4℃條件下振蕩30-40分鐘。 4.在4℃，10000-14000×g條件下離心15分鐘。 5.將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到皮膚組織蛋白。 6.將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
常見問題分析
1.蛋白濃度低？ 處理部分組織樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。 皮膚組織蛋白質含量較低，適當加大組織上樣量。 2.用什么方法定量蛋白？ 建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。
參考文獻
1.Guoying Miao, Li Sun, Baoguo Liu, et al. MMP9 and RECK expression in cutaneous lichen planus Int J Clin Exp Pathol 2016

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