使用注意事項
1、有許多因素影響抗體從膜洗脫,如膜類型、抗體類型和濃度及其與抗原結合特性。因此需要優化抗體去除液中孵育膜的時間。
2、確定膜上抗體是否去除與優化抗體去除液孵育膜的時間:用ECL工作液孵育再生后的膜約1分鐘,然后進行X 光膠片曝光并顯影,可確定膜上的抗體是否去除。如膠片上顯示條帶,表明抗體未去除,應繼續將膜浸泡在抗體去除液中另外孵育30-60 分鐘。然后再次ECL 檢查膜上抗體是否去除。重復此步驟直到抗體去除并確定孵育時間。
3、使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA 封閉的膜上的抗體更容易被去除下來。因此準備進行再生的膜,應該使用脫脂奶粉而不是BSA 封閉。
4、盡量避免使用干燥保存的膜,干的膜上的抗體很難被去除干凈。
5、PVDF 膜上使用的效果好于硝酸纖維素膜。
6、使用非化學發光試劑進行的Western檢測,例如DAB,NBT/BCIP,不適用于本試劑。