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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質生物學>>蛋白提取和裂解>> 全血蛋白提取試劑盒

全血蛋白提取試劑盒
  • 全血蛋白提取試劑盒
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地
屬性

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更新時間：2024-11-24 17:22:52瀏覽次數：84評價

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產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 全血總蛋白提取試劑盒提供適用于從各種動物抗凝/非抗凝全血樣品中提取總蛋白。 本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細胞膜組份，包括細胞質膜、核膜和各種細胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳、免疫沉淀、ELISA、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、酶活性測定等下游蛋白研究實驗。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構象的活性蛋白。 本試劑盒中含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應用不兼容。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
動物全血
產品特點
1.使用方便，將蛋白提取的時間縮短至30分鐘。
2.含蛋白穩定劑，提取的蛋白穩定。
3.紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
4.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 蛋白酶抑制劑混合物避免反復凍融。
? 如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 本試劑盒提取的是全血總蛋白，含所有高豐度的白蛋白等。電泳前可以蛋白稀釋液稀釋至約5 μg/μl。
? 電泳加loading buffer后水煮時，蛋白液有時會變得非常粘稠，可以用65℃保溫10分鐘代替沸水煮。
? 對于某些目的蛋白在血清中含量很低的情況，或者目的蛋白與白蛋白分子量相近的情況，可能需要先去除白蛋白。需要根據情況選擇。白蛋白等去除試劑盒需要自備。

使用方法
1. 提取液制備：
每500 μl蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物，混勻后置冰上備用。
2. 取300 μl全血樣本，加入300 μl蛋白提取液，充分混勻后，在4℃條件下振蕩20-40分鐘。
3. 在4℃，14000×g條件下離心10分鐘。
4. 將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即可得到全血蛋白。
5. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存備用或直接用于下游實驗。
常見問題分析
1.用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。

2.提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結構，沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構象和活性。

3. 電泳蛋白煮樣品后成膠狀？
全血蛋白樣品濃度，需要稀釋到合適的濃度再進行下游檢測。
參考文獻
1.Jidong Liu et al.
Genome sequencing analysis of a family with a child displaying severe abdominal distention and recurrent hypoglycemia
Molecular Genetics & Genomic Medicine 2020

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