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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質生物學>>蛋白提取和裂解>> 細菌蛋白提取試劑盒(免超聲)

細菌蛋白提取試劑盒(免超聲)
  • 細菌蛋白提取試劑盒(免超聲)
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
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  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地
屬性

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更新時間:2024-11-24 18:16:52瀏覽次數:98評價

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產品概述 product description 貝博® BBproExtra® 細菌總蛋白提取試劑盒可以從各種菌體中提取總蛋白,包括革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌,可用于純化蛋白的粗品制備及總蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高質量的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質電泳等下游蛋白研究實驗。本試劑盒提取的蛋白為不具有天然活性的蛋白。本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應用兼容。本試劑盒提取的蛋白樣本含有高濃度的鹽成
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。 2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態,從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴,變成液體狀態后離心至管底部再開蓋。 3.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
WB,IP等
適用樣本
細菌
產品特點
1.使用方便:不需昂貴設備。 2.可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3.將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4.采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5.含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。 6.紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 7.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 8.本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
產品應用
WB,IP等
儀器準備
1.離心機 2.振蕩器 3..渦旋混勻器 4.移液器 5..冰箱 6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液 2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管 2.吸頭 3.一次性手套
使用注意事項
1.預實驗很重要。必須要做預實驗,在正式實驗之前取少量樣本優化實驗條件,并像正式樣本一樣認真進行,看實驗結果是否可行,實驗條件是否適合自己的樣本。由于生物樣本的多樣性,不同樣本的實驗條件通常差異較大,同種細胞的不同模型下需要的實驗條件也可能不同,為了避免浪費正式樣本和試劑,一定要提前預實驗優化實驗條件。 2.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。 3.實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。 4.蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。 5.可以根據自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。 6.本試劑盒中提取液和蛋白酶抑制劑中均不含EDTA,根據需要可自行加入。
使用方法
1.提取液的準備: 根據所需要提取的樣本量,每500 μl裂解液中加入2 μl蛋白酶抑制劑混合物和2 μl磷酸酶抑制劑混合物和5 μl蛋白穩定液,充分混勻后置冰上備用。 2.在4℃, 10000×g條件下將菌液離心5 min,棄上清,盡量吸干剩余液體,收集菌體。 3.用PBS洗菌體一次。若為冷凍菌體直接進行下面操作步驟即可。 4.按每50-100 mg濕重菌體樣本加入250-500 μl提取液,吹打混勻,2-8℃振蕩45-60分鐘。 5.在4℃, 12000×g條件下將菌液離心5分鐘,將上清移入冷的干凈離心管。 6.即得到細菌總蛋白樣品。 7.將總蛋白樣品定量后分裝置于-80℃冰箱或直接用于下游實驗。
常見問題分析
1.蛋白濃度低? 處理部分樣本時可能沒有裂解,導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續振蕩的條件下處理,沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。有些革蘭氏陽性菌可能較難裂解,有條件的話進行超聲處理。 2.用什么方法定量蛋白? 建議用BCA法。不適合用Bradford法,因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份,導致定量不準。如果已經進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系,則可以用Bradford法定量。 3.提取時出現膠狀沉淀? 蛋白提取液處理產物中有時會出現少量透明膠狀物,屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復合物。不檢測和基因組DNA結合特別緊密的特定蛋白的情況下,可以直接離心取上清進行后續實驗即可;如果需要檢測和基因組結合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理,300w/10秒間隔10秒,超聲3分鐘,隨后離心取上清用于后續實驗。 4.提取的蛋白具有活性嗎? 本試劑盒含有破壞蛋白天然結構的組份,有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞,蛋白無法保持其天然構象和活性。需要活性蛋白的可以選擇貝博其它貨號的試劑盒產品。
參考文獻
1.HaiFeng Su et al. An integrated approach combines hydrothermal chemical and biological treatment to enhance recycle of rare metals from coal fly ash Chemical Engineering Journal 2020 (IF=8.355) 2.HF Su et al. A sequential integration approach using Aspergillus Niger to intensify coal fly ash as a rare metal pool Fuel 2020 (IF=5.128) 3.H Shi et al. Highly efficient visible light driven photocatalytic inactivation of E. coli with Ag QDs decorated Z-scheme Bi2S3/SnIn4S8 composite Applied Catalysis B: Environmental 2019 (IF=11.698)

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