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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細胞分析>>細胞代謝>> 天氨基轉移酶(AST)檢測試劑盒2

天氨基轉移酶(AST)檢測試劑盒2
  • 天氨基轉移酶(AST)檢測試劑盒2
參考價 面議
具體成交價以合同協議為準
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  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地
屬性

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更新時間:2024-11-25 10:39:40瀏覽次數:103評價

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產品概述 product description 轉氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之間氨基轉換反應的一組酶,天氨基轉移酶(AST)舊稱谷草轉氨酶(GOT)主要存在于心肌、骨骼肌、肝臟,以心肌含量,肝臟次之。AST能夠催化天和a-酮戊二酸的氨基轉移作用,形成和草酰乙酸。 貝博天氨基轉移酶(AST)檢測試劑盒(賴氏微板法)其檢測原理是天氨基轉移酶(AST)催化天與α-酮戊二酸之間的氨基轉移反應,在ALT催化下,其反應公式如下:L-天+α-酮戊二酸→草酰乙酸+L- 二硝基苯肼與α-酮酸反應,生成相應的二硝基苯腙,在堿性條件下,二硝基苯腙的吸收光譜有差異,通過分光光度計檢測在500-520nm處差異,以等摩爾濃度計算出丙酮酸的生成量,進而計算酶的活......
保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
開蓋后組份按要求條件保存。
有效期
6個月
檢測方法
微孔板,酶標儀
適用樣本
血清、血漿、細胞、組織
產品應用
微孔板,酶標儀
儀器準備
1.酶標儀
2.離心機
3.水浴鍋
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.蒸餾水
耗材準備
1.離心管
2.96孔板
3.吸頭
4.一次性手套

使用注意事項
1.二硝基苯肼顯色液溶解以后,如果仍然有結晶析出,應棄用。
2.由于賴氏法的特點,在繪制標準曲線時每個點做三管的重復測定,求出各標準管的吸光度均值,減去“0"號管吸光度均值后,對照賴氏單位繪制標準曲線。
3.血清中AST活性在室溫可以保存2天,4℃保存1周,-20℃保存1個月。
4.成批樣本測定時,一般無需每份樣本都做自身血清對照,以試劑空白管代替即可。但對于超過正常范圍的血清樣本,應該進行復測。復測時,每份樣本都應做自身血清對照。
5.嚴重黃疸、脂血或溶血的血清,可能會引起測定管吸光度增高,因此檢測該類樣本時應做自身血清標本對照。
6.當樣本的酶活力大于190卡門單位時,應將樣本進行5-10倍稀釋后再進行測定。
使用方法
準備樣品:
① 血漿、血清樣品:血漿、血清按照常規方法制備,可以直接用于本試劑盒的測定,
-20℃保存1個月有效,用于AST/GOT的檢測。
② 細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進行勻漿,低速離心取上清,-20℃保存1個
月有效,用于AST/GOT的檢測。
③ (選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續
計算單位蛋白重量組織或細胞內的AST/GOT含量。

制作AST標準曲線:
1. 取丙酮酸標準品一支,準確加入丙酮酸標準品稀釋液1ml,配制成丙酮酸標準品100mM,4℃保存備用。
2. 臨用前,取適量100mM丙酮酸標準品和標準品稀釋液按1:49的比例混合,配制成2mM的丙酮酸標準品。
3. 按下表制備標準曲線。
4. 混勻,向各管中加入二硝基苯肼顯色液20ul,混勻37℃孵育20分鐘后,加入AST顯色基液200μl,混勻。
5. 室溫放置5分鐘,酶標儀505nm處,以蒸餾水調零,讀取各孔吸光度。各孔吸光度均減去"0"號孔吸光度,所得吸光度差值(縱坐標)與對應的卡門酶活力單位(橫坐標)作圖。

AST酶促反應:
1. 按照下表設置對照孔、測定孔,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。
2. AST檢測:混勻,室溫放置5min。酶標儀505nm處檢測吸光度,以蒸餾水調零,讀取各孔吸光度值。

計算:
以標準孔活力單位為橫坐標,以吸光度值為縱坐標,繪制標準曲線。
測定管吸光度減去對照管吸光度后(A測定-A對照),從標準曲線查得AST活力單位。

參考范圍:
成年健康人血清AST:8-28卡門單位/ml

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