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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細胞分析>>細胞代謝>> 蛋白質總巰基檢測試劑盒

蛋白質總巰基檢測試劑盒
  • 蛋白質總巰基檢測試劑盒
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更新時間：2024-11-25 13:16:51瀏覽次數：125評價

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產品概述 product description 貝博® BBcellProbe® 總巰基檢測試劑盒是利用經典的Ellman法進行總巰基檢測的試劑盒。試劑盒準確性高，重復性和抗干擾性強，使用方便，可用于測各種蛋白質、抗體等液體樣本。 本試劑盒用于測定蛋白質中的總游離巰基，如果需要測定總半巰基，可以選擇貝博其它貨號的試劑盒（相關產品：BB-472423）。生物體內活性巰基（SH）主要包括巰基和蛋白質巰基。巰基能夠修復氧化損傷的蛋白質，參與活性氧清除。蛋白質巰基主要存在于半，是蛋白質結構和生物體內某些氧化還原反應重要基團，在蛋白質結構中2個巰基脫氫而形成的雙硫鍵，使相鄰多肽得以連接．對于維持蛋白質完整結構作用十分重要。巰基還是很多酶的活性基團，一些重金屬鹽如Hg2+等與酶巰基結合，影響酶活......
保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
1.長期不用可以-20℃保存。
2.避免反復凍融。多次凍融會導致失效。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
4.試劑A低溫保存后可能會有結晶析出，可以置室溫搖勻溶解或者37℃水浴溶解搖勻。
有效期
6個月
檢測方法
分光光度計
適用樣本
蛋白質、抗體等
產品應用
分光光度計
儀器準備
1.分光光度計
2.恒溫水浴鍋
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

試劑準備
1.生理鹽水
2.純水
3.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.比色皿
2.試管
3.吸頭
4.一次性手套
使用注意事項
1.試劑A低溫保存后可能會有結晶析出，可以置室溫搖勻溶解或者37℃水浴溶解后搖勻再使用。
2.試劑B2干粉開蓋使用前先敲入瓶底部，防止開蓋時灑落導致損失。
使用方法
1. 試劑配制：
使用前，準確吸取10ml試劑B1加入試劑B2干粉，充分溶解混勻，即成試劑B工作液，4℃避光保存備用。

2. 樣本處理
蛋白質/抗體等液體樣本：直接檢測或稀釋后檢測。

3. 總巰基的測定
按下表在試管中加入試劑，同時做空白管（無樣品液）、樣品對照管。
【注】：
? 空白管做一個即可，對照管每個樣品均要做。
充分混勻，置室溫靜置10分鐘。412nm，0.5cm光徑，測定各管OD值。
【注】：
? 如果OD值太大，可以將樣品用試劑A稀釋后再檢測。

4. 計算
總巰基含量（mmol/g）
=（測定管吸光度-空白管吸光度-對照管吸光度）÷14.15÷0.5×10÷蛋白含量（mg/ml）
【注】：
? 以上以0.5cm光徑檢測設備為例，如果實際使用的檢測設備是采用1cm光徑，將計算公式中的0.5換成1即可。

【注】：
14.15mM/cm為毫摩爾消光系數；
0.5cm為光徑；
10為反應總體積/樣品取樣量
常見問題分析
1.巰基含量低于預期？
可能是樣品中的游離巰基已經被氧化。
需要限度地減少樣品制備與分析之間的時間間隔，盡快完成分析測定。可以在樣品中加入1-5mM 的EDTA以螯合可能氧化巰基的二價金屬離子。
參考文獻
1.Han-QuanWen, et al.
Enhanced photo-fermentative hydrogen production by synergistic effects of formed biofilm and added L-cysteine
Renewable Energy 2019

2.Yan Yan, et al.
Nanosized functional miRNA liposomes and application in the treatment of TNBC by silencing Slug gene
International Journal of Nanomedicine 2019

3.Guojie Wu, et al.
Preparation of Selenium-Enriched Yeast by Re-Using Discarded Saccharomyces cerevisiae from the Beer Industry for Se-Supplemented Fodder Applications
Applied Sciences 2019

4.Sun, Meng-Ge, et al.
Targeting Epirubicin Plus Quinacrine Liposomes Modified with DSPE-PEG2000-C(RGDfK) Conjugate for Eliminating Invasive Breast Cancer
Journal of Biomedical Nanotechnology 2015

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