膠原酶D-from Clostridium histolyticum
包裝
pkg of 100 mg (11088858001)
pkg of 2.5 g (11088882001)
pkg of 500 mg (11088866001)
濃度
(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)
技術
tissue processing: suitable
異質活性
Clostripain 0.060 U/mg
Proteases 8 U/mg ( Azocoll)
Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)
一般描述
膠原酶D是通過過濾、硫酸銨沉淀、透析和凍干而從溶組織梭菌的培養物中制備的。
特異性
膠原酶可降解天然膠原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶樣酶和中性蛋白酶也會降解其他蛋白質。
應用
來自溶組織梭菌的膠原酶被廣泛用于解聚多種類型的組織(如,肺、心臟、肌肉、骨骼、脂肪組織、肝臟、腎臟、軟骨、乳腺、胎盤、血管、腦、腫瘤),以及用于建立原代細胞培養系統的單細胞懸浮液的制備。當細胞表面蛋白的功能性和完整性很重要時,推薦使用膠原酶D。來自Roche的
梭菌膠原酶已用于從多種類型的組織中進行細胞的制備,如肝細胞、脂肪細胞、胰島、上皮細胞、肌肉細胞、內皮細胞等。然而,應根據經驗確定每個批次的酶對破壞特定組織的適用性。
單位定義
來自Roche的膠原酶以W??nsch單位(在+25°C下每分鐘用W??nsch底物形成μmol的產物)進行測定。
通常,膠原酶活性是以Mandl單位(在+37℃下5小時內從膠原釋放的1 μmol亮氨酸)給出的。
不幸的是,兩個活性單位之間沒有統一的轉換因子,因為Mandl單位部分取決于膠原酶制劑中污染性蛋白酶的濃度,而這是一個不確定的變量。較純的膠原酶制劑相對于粗制劑在Mandl單位中實際上具有更低的比活性。梭菌制劑通常具有約1:1800的轉換因子(如某個特定批次的梭菌膠原酶所含有的約0.15 W??nsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
制備說明
激活劑:Ca2+
工作濃度:0.5 - 2.5mg/ml
儲存條件(工作溶液):-15至-25°C
Roche建議僅重懸需要立即使用的凍干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25℃下儲存長達一周。因為重新配制后活性降低了,所以要避免反復凍融。
抑制劑:
膠原酶抑制劑:EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-巰ji乙醇
膠原酶不會被血清所抑制。
梭菌蛋白酶抑制劑:TLCK
胰蛋白酶抑制劑:抑肽酶,胰蛋白酶抑制劑(蛋清,大豆)
酶活:
膠原酶活性:>0.15 U/mg (基于Wünsch) (+25°C, 4-苯基-偶氮芐基-氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作為底物)
污染性酶活:胰蛋白酶,梭菌蛋白酶和總蛋白水解活性
膠原酶D具有正常至高的膠原酶活性,以及非常低的胰蛋白酶活性(通常<0.2單位/mg,BAEE作為底物)。 上海牧榮生物科技有限公司是一家集成服務商,公司堅持“一站式"服務模式,為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源,加強網絡建設,提高公司內部運作效率,為客戶提供方便、快捷的服務。
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